جداسازی و شناسایی سودوموناس فلورسنت های با توان تولید سیدروفور از ریشه برنج و ارزیابی کارایی آنها

برنج ‭Oryza sativa L.))‬یکی از مهم ترین غلات کشور می باشد که تا کنون برای افزایش عملکرد آن در واحد سطح ، فعالیت های چشم گیر و موثری صورت گرفته است. باکتری های محرک رشد گیاه ‭(Plant Growth Promoting Rhizobacteria‬،‭PGPR) ‬گروه های نامتجانسی از باکتری های مستقر در ریزوسفر می باشند که قادرند با استفاده از مکانیسم های مختلف و در یک یا چند مرحله از رشد گیاه، موجب ارتقا شاخص های رشد گیاه شوند. در این راستا از مناطق عمده برنج کاری استان مازندران، نمونه های خاک و ریشه تهیه شد. ضمن تعیین تراکم جمعیت باکتری های مذکور در ریزوسفر این خاک ها، باکتری های مورد نظر جداسازی شد. پس از جدا سازی و خالص سازی، با استفاده از آزمون های بیوشیمیایی، تا حد امکان شناسایی شد و سپس توان تولید سیدروفور در ایزوله ها تعیین گردید. ایزوله هایی که توان بالایی در تولید سیدروفور داشتند را انتخاب و برای شناسایی مولکولی (با استفاده از تعیین توالی ‮‭16‬‭SrDNA ‬و مارکر ‭RFLP) ‬بکار گرفته شد. بر اساس نتایج بدست آمده ایزوله هایی از خوشه های مختلف که بیشترین قرابت با سودوموناس فلورسنس و سودموناس پوتیدای شاهد داشتند انتخاب و برای آزمایشات گلدانی مورد استفاده قرار گرفت. یک آزمایش گلدانی، به منظور تاثیر باکتری ها بر رشد و عملکرد برنج رقم طارم، در قالب طرح کامل تصادفی و به صورت فاکتوریل شامل فاکتور باکتری (در شش سطح: پنج ایزوله و یک تیمار شاهد بدون تلقیح) و فاکتور خاک (در سه نوع خاک تیپیک منطقه) و در چهار تکرار انجام شد. نتایج نشان داد که جمعیت باکتری های سودوموناس فلورسنت در نمونه های مختلف از ‮‭106‬*‮‭3/6‬ تا ‮‭107‬*‮‭9/1‬ متغیر بود. فراوانی سودوموناس پوتیدا بیشتر از ایروجینوزا و فلورسنس بود. بنابر این غالب سودوموناس های ریزوسفر مزارع برنج استان مازندران از گونه سودوموناس پوتیدا بودند. نتایج مولکولی نشان داد که کل ایزوله ها در هشت گروه دسته بندی شد. هفت ایزوله مربوط به ‮‭4964‬ ‭P.Fluorescens ATCC ‬بود ، شش ایزوله شبیه به ژنو تایپ ‮‭4964‬ ‭P .Fluorescens ATCC. ‬چها ر تا از ایزوله های ما با ژنوتایپ سودوموناس پوتیدا ‭(P.putida ATCC ‬‮‭12633‬‭P) ‬شبیه بود و کلاستر ایجاد کرد. و دو تا ایزوله های ما با ژنوتایپ سودوموناس ایروژنوزا ‭(P.aerugenosa GRP‬3) خوشه بندی شد. دو ایزوله از دیگر ایزوله ها متفاوت بود. واژه های کلیدی: باکتری های محرک رشد گیاه، برنج ، سودوموناس های فلورسنت