جداسازی و شناسایی تیپ های مختلف کلستریدیوم پرفرنجنس از موارد مشکوک به انتروتوکسمی در استان فارس

یکی از بیماریهای شایع گاو و گوسفند و سایر حیوانات اهلی در جهان و ایران، آنتروتوکسمی می باشد .عامل مرتبط با بیماری ، باکتری کلستریدیوم پرفرنجنس است که بر اساس تولید 4 نوع اصلی توکسین (الفا ،بتا،اپسیلون و یوتا) به پنج تیپ توکسیژنیک A،B،C،D،‭E)) ‬تقسیم بندی می شود.این توکسینها نقش مهمی در بیماریزایی باکتری ایفا میکنند.مقادیر بالایی از این توکسینها به همراه تعداد زیادی باکتری در محتویات روده حیوانات مرده یا بیمار وجود دارد.شناسایی توکسین در محتویات روده کوچک راهی مطمین و قطعی جهت شناسایی آنتروتوکسمی است.هدف از این تحقیق جداسازی و شناسایی تیپهای مختلف کلستریدیوم پرفرنجنس از موارد مشکوک به انتروتوکسمی در استان فارس به روش کشت و ‭Elisa ‬می باشد.بدین منظور تعداد ‮‭167‬ نمونه محتویات روده از موارد مشکوک به انتروتوکسمی در سطح استان فارس جمع آوری گردید و بروی محیطهای ‭TSC ‬همراه سیکلوسرین و ‭BA ‬همراه با نیومایسین کشت داده شدند.سوشهای جدا شده بعنوان کلستریدیوم پرفرنجنس با استفاده از 5 جفت پرایمر از نظر تایید گونه کلستریدیوم پرفرنجنس و وجود ژنهای4 نوع توکسین مورد بررسی قرار گرفته و تیپ بندی شدند.همچنین وجود توکسینهای الفا ،بتا و اپسیلون در محتویات روده با استفاده از روش الایزا مورد بررسی قرار گرفت .در نتیجه روش کشت ‮‭102‬ باکتری کلستریدیوم پرفرنجنس جدا شد که توسط تستهای بیوشیمیایی و ‭PCR ‬تایید شدند. تیپ بندی بر اساس روش ‭ PCR‬نشان داد که بیشترین ژنوتیپ مربوط به تیپ %‮‭45‬‭) A) ‬بود.پس از آن بیشترین فراوانی بترتیب مربوط به تیپهای ‭D ‬، ‭B ‬و در نهایت تیپ ‭C ‬بود. همچنین هیچ تیپ ‭E ‬نیز جداسازی نشد. در مقایسه روش الایزا ، بیشترین تیپ عامل بیماری را تیپ ‭D ‬نشان داد(%‮‭40‬) . بعلاوه در روش کشت و الایزا نتیجه یکسانی در مورد تیپ ‭B ‬و ‭C ‬بدست آمد. کلمات کلیدی:کلستریدیوم پرفرنجنس ، توکسین ، ‭Elisa