مقایسه دو روش شناورسازی (Swim up) هیستوپرپ (Histoprep) برای خالص سازی اسپرم اپیدیدیمی گاومیش

در هنگام تهیه اسپرم اپیدیدیمی ورود انواع مختلف سلول های خونی پوششی به همراه اسپرم در محلول تهیه اسپرم اجتناب ناپذیر است. وجود این دسته از سلول ها بر حیات اسپرم میزان لقاح در برنامه لقاح آزمایشگاهی تاثیر نامطلوب دارد. برنامه شناورسازی واستفاده از شیب پرکل دو روش شناخته شده جداسازی اسپرم در این رابطه می باشند. هیستوپرپ Histoprep, BAG Health) (Care GmbH, Germany ترکیبی از فیکول است که در جداسازی سلول های خونی مورد استفاده قرار می گیرد. در این مطالعه شناورسازی با روش توصیه شده هیستوپرپ برای سلول های خونی در جدا سازی اسپرم اپیدیدیمی مقایسه شده است. تعداد بیضه سالم گاومیش بالغ از کشتارگاه فراهم گردید. اسپرم اپیدیدیمی با جداسازی دم اپیدیدیم در محیط حاوی تیرود لاکتات در دمای 39 درجه به مدت 15 دقیقه اسخراج گردید. محیط حاوی اسپرم سانتریفیوژ 1200) به مدت 15 دقیقه) شده تعداد اسپرم درصد تحرک پیشرونده مورد بررسی قرار گرفت. سپس رسوپ حاصله به د.قسمت تقسیم شده نیمی برای برنامه شناورسازی (به مدت ساعت در دما39 درجه سانتیگراد) در سی سی محیط نیم دیگر در بر روی سی سی هیستوپرپ قرار گرفت. با دور 500 به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد. نمونه ای از هر دو روش فراهم تحرک تعداد اسپرم به دست امده بررسی گردید. نتایج نشان داد بیشترین میزان تحرک اسپرم به دست آمده در روش شناورسازی (% 76/8) در مقایسه با هیستوپرپ (% 76/6) تحرک اولیه (%56) محاسبه گردید.(P<0/05) با این حال تعداد اسپرم به دست آمده در برنامه شناورسازی (3/6 106) بسیار کمتر از روش های دیگر (هیستوپرپ: 106 76 غلظت اولیه: (152 106 بود. به نظر می رسد روش مرسوم برای جداسازی سلول های خونی به وسیله هیستوپرپ برای جداسازی اسپرم اپیدیدیمی مناسب نیست نیازمند بهینه سازی است.

کلیدواژه ها:

گاومیش ، اسپرم اپیدیدیمی ، شناورسازی ، هیستوپرپ