جداسازی سویه های بومی بیفیدوباکتریوم با استفاده از روش کلاسیک و PCR

بیفیدوباکتریوم ها از مهمترین گونه های پروبیوتیکی شناخته شده هستند و امروزه تلاش های وسیعی در جهت جداسازی این باکتریها ازمنابع مختلف جهت استفاده از آنها در محصولات غذایی در حال انجام است، هدف از این مطالعه جداسازی سویه های بومیبیفیدوباکتریوم ها از محصولات لبنی بومی بود.در این تحقیق با استفاده از محیط های کشت اختصاصی، آزمون انحصاری فروکتوز 6فسفات فسفوکتولاز و مقاومت به میوپیروسین ما قادر به جداسازی 37 ایزوله باکتریایی به عنوان بیفیدوباکتریوم از محصولات لبنی بومی شدیم .به علاوه در این تحقیق به طور هم زمان با استفاده از تکنیک PCR و تکثیر نواحی از ژن 16SrDNA و با استفاده از پرایمرهای Bif164, Bif662 به طول 523 و 1350 جفت باز به تایید باکتریهای جداشده پرداختیم. در نهایت محصول PCR قطعه 523 جفت بازی، پس از خالص سازی تعیین توالی گردید و با استفاده از برنامه های نرم افزاری مناسب به مقایسه این توالی، با توالی های بانک ژن و یگدیگر پرداختیم.توالی محصولات PCR با قسمتی از ژن 16SrDNA بیفتد و باکتریوم هم خوانی بالایی داشت و لذا اختصاصی بودن محصولات PCR تأیید شد. و در نهایت 6 ژن جدید با نام های EU7464407,EU7446408, EU594329,EU594328,EU7464405 در بانک ژن به ثبت رسید و ثبت سویه ها فوق در کلکسیون میکروبی ایران در حال انجام است . به نظر می رسد که باکتریهای ایزوله شده اانتخاب های مناسبی برای استفاده در صنایع لبنی می باشند.