بررسی مولکولی خودسازگاری برخی از ژنوتیپ ها و ارقام منتخب سیب (فاز‭2)‬

در پایان مرحله اول پروژه (‮‭1383 -1391‬)، ارقام بومی و وارداتی کاملا خودناسازگار و یا در سطوح مختلف خودسازگاری شناسایی گردید و ارقام و ژنوتیپ ها بر اساس تجزیه کلاستر، گروه بندی شدند. در فاز دوم، به منظور بررسی ساز و کار خود سازگاری در سطح ملکولی و انطباق با نتایج بدست آمده در شرایط باغ، در سال ‮‭1391‬ اقدام به تهیه نمونه های برگی از ‮‭24‬ رقم و یا ژنوتیپ گزینش شده سیب و نیز 1 رقم شاهد تجارتی وارداتی از ایستگاه تحقیقات باغبانی کمالشهر گردید. پس از استخراج ‭DNA ‬ژنومی بر اساس پروتکل ‭CTAB‬، کمیت و کیفیت نمونه ‭DNA ‬استخراجی به کمک الکتروفورز روی ژل آگارز و نیز اسپکتروفتومتری تعیین شد و غلظت مناسب ‭DNA ‬جهت استفاده در واکنش های زنجیره ای پلیمراز ‭(PCR) ‬آماده گردید. انواع آغازگرهای مورد استفاده برای شناسایی آلل های ‭S ‬سیب تهیه شد. تعیین ژنوتیپ ارقام مورد مطالعه برای صفت خودسازگاری ‭(S-genotyping) ‬از طریق به دست آوردن الگوی باند های تکثیر یافته به کمک ‭PCR ‬و انجام الکتروفورز بر روی ژل آگارز عملی گردید. با مراجعه به منابع و گزارشهای قبلی، اندازه باندهای به دست آمده با داده های قبلی مقایسه شد. مقایسه نتایج حاصله با رفتار فنوتیپی ارقام از حیث خودناسازگاری/ناسازگاری انجام گرفت. نتایج نشان داد که با استفاده از یک جفت آغازگر عمومی و هشت جفت آغازگر اختصاصی در ارقام و ژنوتیپ های عسلی، آی آر آی6 (3‭S)‬، مشهد (1‭S)‬، آی آر آی8 (2‭S) ‬یک آلل، در ارقام و ژنوتیپ های قره قاچ، گلاب اصفهان، زینتی، آی آر آی،1 آی آر آی،5 گلدن اسموتی و گلدن دلیشز دو آلل (2‭S ‬3‭S ) ‬و در ارقام نارسیب مشهد، اردبیل2 (1‭S ‬2‭S ‬3‭S)‬، و ژنوتیپ انگلیسی شیراز (2‭S ‬3‭S ‬4‭S) ‬سه آلل شناسایی شد و در بقیه ارقام علی رغم این که وجود آلل خودناسازگاری محرز بود ولی آغازگرهای اختصاصی الل های 1و 2 و 3 و 4 و 5 و 7 و 9 و ‮‭10‬ مورد استفاده قادر به شناسایی آنها نبودند که این موضوع نشان می دهد بایستی از سایر آغازگرها نیز جهت تکمیل اطلاعات استفاده کرد. واژه های کلیدی: سیب، خودسازگاری، الل های خودناسازگاری، ‭S-alleles ‬،‭PCR ‬، الل تریپلویید