بررسی آلودگی های کشت سلولی سلول های ‭5-Vero‬، ‭MRC ‬و ‭13-RK ‬از نظر وجود سلول های ‭HeLa ‬با استفاده از روش ‭Short tadem repeat DNA profiling‬

استفاده از کشتهای سلولی یکی از ابزارهای مهم پژوهشهای زیستی می باشد. آلودگی کشت های سلولی با سلولهای ‭HeLa ‬به عنوان خطری بالقوه برای تحقیقات سلولی و نتایج حاصل از آن محسوب می شود. در این تحقیق از آنالیز توالی های تکراری کوتاه ‭(STR) ‬برای تشخیص آلودگی های سلولی به ‭HeLa ‬استفاده شده است. مواد و روش ها: برای تشخیص آلودگی سلولهای‭RK-‬‮‭13 , Vero ‬و 5‭-MRC ‬به سلول های ‭HeLa‬، از تعداد سیزده ‭STR‬؛ مبتنی بر سیستم ‭Combined DNA Index System (CODIS) ‬همراه با ژن آمیلوژنین (برای تشخیص جنسیت سلول ها) استفاده شد. برای تکثیر ‭STR‬ها از ‭PCR ‬استفاده گردید، برای مشاهده اندازه هر کدام از ‭STR‬ها الکتروفورز با ژل پلی اکریل آمید ‭(PAGE) ‬بکار گرفته شد. در نهایت با رنگ آمیزی ژل با نیترات نقره و تجزیه و تحلیل باند های بدست آمده، بوسیله نرم افزار ‭Labworks‬، کدهای عددی هر کدام از‭STR‬ها با کدهای عددی ‭STR‬های موجود در دو مرجع ‭(ATCC) ‬و ‭(JCRB) (‬برای تعیین آلل معرف نوع سلول) مقایسه شدند. یافته ها و نتیجه گیری: نتایج بدست آمده نشان داد که سلول های مورد مطالعه، فاقد آلودگی به ‭HeLa ‬می باشند. آلودگی عمدی سلولها با سلولهای ‭HeLa ‬به میزان %‮‭10‬ برای 5‭-MRC ‬و %5 برای ‭Vero ‬و %2 برای ‮‭13‬‭-RK ‬با این روش تشخیص داده شد که می تواند به عنوان معیاری برای حساسیت روش استفاده از آنالیز توالی های تکراری کوتاه ‭(STR) ‬بکار رود. کلمات کلیدی: آلودگی کشت سلول، انگشت نگاری ژنتیک، توالی های تکراری کوتاه‭(STR)‬، رده سلولی ‭HeLa.