بررسی اثر مایع آلانتوییک تخم مرغ جنین دار بجای تریپسین در محیط کشت سلولی جهت تکثیر سوش واکسینال B1 ویروس نیوکاسل

سال انتشار: 1389
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 673

نسخه کامل این مقاله ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

THVC16_0830

تاریخ نمایه سازی: 11 اردیبهشت 1398

چکیده مقاله:

امروزه جهت جداسازی،شناسایی تشخیص سوش های مختلف ویروس نیوکاسل از کشت سلول اولیه یا رده سلولی استفاده میگردد.سوش های واکسینال ویروس نیوکاسل جهت رشد در محیط های کشت سلولی نیاز به پروتیازهایی نظیر تریپسین جهت شکستن پروتیین فیوژن تکثیر ویروس دارند. لذا لازم است این آنزیم در هنگام کشت ویروس به محیط کشت اضافه شود. از آنجایی که سرم موجود در محیط کشت سلولی می تواند باعث غیر فعال شدن تریپسین گردد از طرفی عدم وجود سرم در محیط کشت سلولی موجب رشد نامناسب سلول میشود بنابراین کاربرد تریپسین جهت رشد ویروس با مشکلاتی همراه است. مایع آلانتوییک تخم مرغ جنین دار به علت داشتن خاصیت پروتیازی فعالیت در محیط حاوی سرم شاید بتواند جایگزین مناسبی برای آنزیم تریپسین، جهت تکثیر ویروس باشد.هدف از این مطالعه امکان استفاده از مایع آلانتوییک تخم مرغ جنین دار بررسی رقت های آن جهت جایگزینی با آنزیم تریپسین میباشد.ابتدا سوش واکسینال ویروس عامل بیماری نیوکاسل از موسسه رازی تهیه EID50 آن باروش رید مانچ محاسبه شد. سلول MDCK (Madian, Darby canine kidney) برروی پلیت کشت سلولی بصورت مونولایر تهیه گردید. بر اساس روش استاندارد ویروس عامل بیماری نیوکاسل B1 برروی سلولهای مونولایر MDCK تلقیح داده شد سپس به گروه اول محیط کشت (Modified Eagle medium) DMEM Dulbecco حاوی آنزیم تریپسین آگار اضافه شد، به گروه دوم، محیط کشت همراه با مایع آلانتوییک تخم مرغ جنین دار به گروه سوم محیط کشت خالص اضافه گردید. روزانه تمامی سلولها با استفاده ازمیکروسکوپ مورد بررسی قرار گرفت تغیرات سلولی ایجاد شده در آنها مورد مطالعه قرار میگرفت. در زمان های 48 72 96 ساعت محاسبه EID50 ویروس در هر گروه سلولی صورت پذیرفت نتایج بدست آمده نشان داد که ویروس سوش واکسینال B1 درهر گروه سلولی مورد آزمون با تریپسین مایع آلانتوییک توانایی رشد تکثیر داشته اما در گروه کنترل ویروس تکثیر پیدا نکرد.بنابراین بنظر میرسد مایع الانتوییک حاوی آنزیم هایی است که میتواند در شکسته شدن پروتیین فیوژن ویروس عامل بیماری نیوکاسل نقش داشته باشد در محیط سلولی جهت رشد تکثیر ویروس های لنتوژن عامل بیماری نیوکاسل مورد استفاده قرار گیرد.

کلیدواژه ها:

ویروس نیوکاسل آنزیم تریپسین مایع آلانتوییک

نویسندگان

محمدجواد مهربانپور

موسسه تحقیقات واکسن سرم سازی رازی شیراز

سمیه السادات سیوف

موسسه تحقیقات واکسن سرم سازی رازی شیراز

عبداله رحیمیان

موسسه تحقیقات واکسن سرم سازی رازی شیراز

فرشید کفیل زاده

موسسه تحقیقات واکسن سرم سازی رازی شیراز