تولید آنتی بادی نوترالیزان علیه باکتری ETEC در موش با استفاده از تجویز دهانی LTB بارگذاری شده بر روی نانوذرات سیلیکای مزومتخلخل

مقدمه: ای. کولای انتروتوکسیژنیک (ETEC) مهمترین عامل اسهال مسافران و یکی از مهمترین عوامل باکتریایی ایجاد کننده اسهال عفونی در کودکان می باشد. سویه های سم زای این باکتری از لحاظ بیوتروریستی دارای اهمیت بوده و پیشگیری از ابتلا به عفونت گوارشی ناشی از این باکتری دارای اهمیت زیادی می باشد. در این مطالعه پروتیین LTB به عنوان کاندید واکسن نوترکیب علیه باکتری ETEC بر روی نانوذرات سیلیکای مزومتخلخل بارگذاری شده و توانایی تولید آنتی بادی نوترالیزان توسط این فرمولاسیون در موش مورد بررسی قرار گرفت.مواد و روش ها: در این مطالعه ابتدا پروتیین LTB بیان و با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی تخلیص گردید. در مرحله بعد، نانوذرات سیلیکای مزومتخلخل به روش حذف الگو ساخته شدند و با استفاده از روش های میکروسکوپی SEM و STEM و نیز با استفاده از تکنیک DLS اندازه آنها و نیز توزیع اندازه آنها تعیین گردید. سپس پروتیین LTB به روش جذب فیزیکی بر روی نانوذرات بارگذاری شد. پس از آن، نانوذرات بارگذاری شده با پروتیین از مسیر دهانی به موش ها تجویز و بعد از طی مراحل واکسیناسیون، سرم موش ها جداسازی شد. سپس برای بررسی اثر خنثی کنندگی آنتی بادی های موجود در سرم، اثر سرم در اتصال LT به گانگلیوزیر GM1 بررسی شد.نتایج: پروتیین نوترکیب LTB تخلیص و با استفاده از تکنیک وسترن بلاتینگ تایید گردید. نانوذرات سیلیکای ساخته شده دارای اندازه ای 92±5 نانومتر و با توزیع اندازه مناسب بودند. تجویز فرمولاسیون نانویی به موش ها باعث تحریک تولید آنتی بادی IgG شد. نتایج محیط کشت نشان داد که آنتی بادی تولید شده دارای خاصیت خنثی کنندگی مناسب می باشد و مانع اتصال سم LT بهGM1 می شود.نتیجه گیری کلی: تجویز نانوذرات سیلیکای بارگذاری شده با LTB میتواند باعث تولید آنتی بادی نوترالیزان در موش گردد، به طوری که سرم موش های واکسینه شده قادر است مانع اتصال سم LT به گیرنده های GM1 شود.

کلیدواژه ها:

ای. کولای انتروتوکسیژنیک ، کاندید واکسن ، نانوذرات سیلیکا ، نانوادجوانت