تعیین هویت مولکولی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس در بیماران استان فارس به وسیله تکنیک های RD Typing و PCR-RFLP

بیماری سل، بیماری زیونوزی است که به عنوان یکی از مهم ترین بیماری های تهدید کننده انسان و دومین عامل عفونی در انسان می باشد. تمایز گونه های مختلف کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس به رو شهای معمول زمان برو از طرفی، تشخیص دقیق جهت درمان به موقع بیماران، نقش حیاتی را ایفا مینماید. لذا هدف از این مطالعه، شناسایی جنس مایکوباکتریوم و تعیین هویت مولکولی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس در بیماران استان فارس به وسیله تکنیکهای RD typing و PCR-RFLP بود. ژنوم 50 جدایه با استفاده از روش جوشاندن استخراج گردید. برای تعیین جنس این جدایه ها از تکنیک PCR بر اساس قطعه 16S rRNA استفاده گردید. تکنیک PCR IS6110 و تکنیک RD typing نیز به ترتیب برای شناسایی و تعیین هویت باکتری مورد استفاده قرار گرفت. در نهایت، با استفاده از تکنیکهای RD typing و PCR-RFLP بر روی ژن oxyR جهت تعیین هویت مایکوباکتریو م/تعیین گونه مایکوباکتریوم انجام شد. تمامی جدای هها با استفاده از تکنیک PCR برای 16S rRNA باند 543 جفت باز را نمایش دادند و با استفاده از PCR برای IS6110 ، باند 245 جفت باز را نمایش دادند که مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس را اثبات کردند. در تعیین هویت RD9 ،RD4 ،RD typing،RD1 و RD12 به ترتیب باندهای 146،172،235 و 365 شناسایی شدندکه مشخص شد تمامی جدایه های مورد مطالعه گونه توبرکلوزیس م یباشند. با استفاده از تکنیک PCR-RFLP روی ژن کاذب oxyR هویت مولکولی RD typing تایید شد. نتایج در این مطالعه نیز نشا ندهنده قدرت تکنیک RD typing درتمایز بین مایکوباکتریو مها می باشد و مشخص گردید تمام جدایه های ارسالی از شیراز، مایکوباکتریوم توبرکلوزیس هستند و مایکوباکتریوم بوی س مشاهده نشد. عدم وجود گونه بویس در جدایه های ارسالی از شهر شیراز، نشا ندهنده بهداشت مناسب شیر پاستوریزه در این شهر می باشد.

کلیدواژه ها:

کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ، RD typing ، PCR16S rRNA ، S6110