بررسی اثر یون آزاید بر عملکرد آنزیم لاکتوپراکسیداز شیر گاو

آنزیم لاکتوپراکسیداز یکی از پروتیین های مهم شیر بوده که عملکرد دفاعی علیه واریته های مختلف میکروارگانیسمها منجمله باکتری های مضر در شیر را ایفا می نماید. این آنزیم جهت عملکرد خود نیاز به حضور دو فاکتور دیگر به نامپراکسید هیدروژن ((H(2)O(2) و یون تیوسیانات (SCN) دارد. این سه جزء با هم سیستم لاکتوپراکسیداز در شیر را تشکیلمی دهند. وجود سیستم لاکتوپراکسیداز در شیر باعث افزایش پایداری آن در برابر فساد می شود. در این تحقیق هدفبررسی اثر غلظت های مختلف یون آزاید به عنوان یک ترکیب سمی و آلوده کننده محیط زیست بر فعالیت آنزیملاکتوپراکسیداز جداشده از شیر گاو می باشد. برای تخلیص جزیی لاکتوپراکسیداز از شیر گاو، ابتدا نمونه های شیر بوسیلهسانتریفیوژ چربی زدایی گردید سپس جهت رسوب پروتیین کازیین شیر، pH شیر از 6 به 4/7pH (نقطه ایزوالکتریککازیین) کاهش داده شد. پس از سانتریفیوژ نمونه های حاصله، محلول رویی به عنوان منبع آنزیمی مورد استفاده قرارگرفت. فعالیت آنزیم با استفاده از سوبستراهای ABTS و پراکسیدهیدروژن در طول موج 412 نانومتر اندازه گیری گردید.جهت بررسی اثر یون آزاید بر فعالیت آنزیم، ابتدا غلظت های مختلف یون آزاید در محیط واکنش آنزیمی اضافه و سپسفعالیت آنزیم درحضور یون آزاید بررسی گردید. نتایج نشان داد که اولا pH بهینه برای فعالیت ماکزیمم آنزیملاکتوپراکسیداز pH=6 می باشد که با pH شیر گاو برابر می باشد. همچنین مقدار یون آزایدی که باعث کاهش 50درصدی فعالیت آنزیم لاکتوپراکسیداز گردید برابر با 3/80 میکرومولار بدست آمد.

کلیدواژه ها:

آزاید ، شیر گاو ، لاکتوپراکسیداز ، مهارکننده