انتقال ژن EGFP به کلونی اسپرماتوگونی گوساله به روش لیپوفکسیون

زمینه مطالعه: در بالغین، سلو لهای بنیادی اسپرماتوگونی ) SSCs ( تنها سلو لهای بنیادی هستند که قادر به انتقال اطلاعات ژنتیکی به نسل بعد م یباشند. با در نظر گرفتن این که یک SSC منفرد م یتواند به تعداد زیادی از اسپرماتوزوآ تبدیل شود، دستکاری ژنتیکی این سلو لها یکتکنولوژی نوین با کاربردهای عملی در گون ههای مختلف حیوانی را مهیا م یسازد. هدف: در این مطالعه ارزیابی انتقال ژن ) EGFP (ر EnhancedGreen Fluorescent Protein به کلون یهای اسپرماتوگونی گاوی از طریق حامل لیپوزومی و بهترین روز انکوباسیون در جذب ژن توسط کلون یهای اسپرماتوگونی بررسی شد. روش کار: کارایی انتقال ژن خارجی EGFP به SSCs از طریق Lipofection در سه روز از شروع کشت کلون یهای اسپرماتوگونی )روز 4،6 و 8( توسط میکروسکوپ فلورسنت ارزیابی شد .توسط رنگ آمیزی ایمنوسیتوفلورسنت علیه مارکرهای OCT4و Vimentin ، ماهیت SSCs و سلو لهای سرتولی تأیید شد. نتایج: نتایج نشان داد که کلون یهای ترانسفکت شده از طریق lipofection درهر سه روز انجام ترانسفکشن در مقایسه با گرو ههای شاهد به طور معن یداری افزایش یافت ) p>0.05 (. کلون یهای ترانسفکت شده در مقایسه با گرو ههای بدون حامل ژن خارجی نیز بالاتر بود )معن یدار( نرخ آلوده سازی کلونی زمانی که ترانسفکشن در روز 4 کشت انجام شد بود بیشتر بود. نتیج هگیری نهایی: نتایج بدست آمده از این مطالعه پیشنهاد م یکند که لیپوفکتامین م یتواند به منظور انتقال مستقیم DNA خارجی به کلونی اسپرماتوگونی به ویژه در روز 4 کشت به صورت ایمن به کار رود

کلیدواژه ها:

ترانسفکشن ، سلو لهای بنیادی اسپرماتوگونی ، Lipofectamine