بررسی خصوصیات مولکولی ویروس Carnation necrotic fleck virus در ایران

ویروس Carnation necrotic fleck virus (CNFV) یکی از ویروسهای مخرب آلوده کننده میخک (Dianthus caryophyllus L.) می باشد. این ویروس باعث ایجاد علایمی از قبیل رگه های خاکستری و لکه های قرمز رنگ نکروتیک دربرگها می گردد. CNFV متعلق به جنس Closterovirus از خانواده Closterovirideae بوده و دارای ژنوم RNA تک رشته ای مثبت بطول Kb 21/8 است. در این بررسی 88 جدایه میخک واجد علایم از گلخانه های استان مرکزی، تهران و مازندرانجمع آوری گردید. بررسی سرولوژیکی با روش DAS-ELISA و بوسیله آنتی بادی چند همسانه ای نشان داد که % 8 جدایه هاآلوده به CNFV می باشند. به منظور بررسی خصوصیات بیولوژیک، برگ نمونه های میخک مثبت در آزمون الیزا در بافر فسفات 7/ 5 مولار 6 / سدیم 518 pH له شده و عصاره حاصل بطریقه مکانیکی برای آلوده سازی گیاهان محک میخک (Dianthus caryophyllus L.) مورد استفاده قرار گرفت. پس از 28 روز علائم موزائیک (Mottling) ، رگ روشنی (vein clearing) و لکه های خاکستری رنگ بصورت خفیف در برگ گیاهان محک ظاهر شدند. تکثیر ژن شوک حرارتی 75 کیلو دالتونی ویروس با روش RT-PCR و با پرایمر های اختصاصی انجام شد. محصول تکثیر در وکتور pT257R/T همسانه سازی و در ادامه تعیین توالی شد. بررسی توالی نشان داد که قطعه تکثیر شده bp2507 طول داشته و دارای99/7درصد شباهت با ژنhsp70جدایه Yunnan ( EU884443.1 ( گزارش شده از کشور چین می باشد.

کلیدواژه ها:

میخک ، Carnation necrotic fleck virus ، الایزا ، ژن شوک حرارتی ، RT-PCR