همسانه سازی پیشبر 2A11 گیاه گوجه فرنگی و بررسی بیان موقت با استفاده از سیستم اگرواینفیلترشن

بیان موقت زن های بیگانه در بافت های گیاهی برای آالیز عملکرد ژن در زمان کوتاه روش کارآمدی می باشد. این روش سریع ، انعطاف پذیر ، ساده و در بافت های تمایز یافته قابل اجرا است. پیشبر 2A11 از پیشبرهای ویژه بافت میوه گیاه گوجه فرنگی است که باعث بیان بالای ژن 2A11 در میوه می شود. هدف از این تحقیق همسانه سازی پیشبر 2A11 و بررسی بیان اختصاصی ان می باشد. پس از استخراج DNA زنومی از گیاه گوجه فرنگی ، پیشبر 2A11 با استفاده از پرایمر اختصاصی تکثیر شده و در ناقل همسانه ساز PTZ57R/T همسانه سازی شد. قطعه مورد نظر با دو آنزیم برشی BamH1 و HindIII جدا و جایگزین پیشبر دایمی CaMV35S در ناقل دو گانه pBI121 گردید. پلاسمیدهای نوترکیب به روش شوگ حرارتی به Agrobacterium tumefaciens سویه LBA4404 منتقل شدند. با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن بیان اختصاصی ژن gus در بافت های گیاهان گوجه فرنگی مورد بررسی قرار گرفت. نایج حاصل مشان دا که در مقایسه با پیشبر CaMV35S ، 2A11 نیز با کارایی بالایی باعث بیان زن gus در میوه گوجه فرنگی می شوند. بنابراین از این پیشبر می توان برای بیان اختصاصی پروتئین های نوترکیب در میوه گوجه فرنگی استفاده کرد.

کلیدواژه ها:

اگرواینفیلتریشن ، بیان موقت ، پیشبر 2A11 ، همسانه سازی