ارزیابی مقاومت چند رقم زیتون به بیماری پژمردگی ورتیسلیومی به منظور تولید در قلمستان های جدیدالتأسیس با استفاده از تکنیک نوینReal- time PCR

پژمردگی ورتیسلیومی یکی از بیماریهای مهم زیتون است که باعث تخریب سیستم آوندی و در نهایت مرگ گیاه میشود.استفاده از ارقام مقاوم یکی از مؤثرترین روشهای کنترل بیماری محسوب میشود. ابتدا قطعات نمونه برداری شده از زیتون های آلوده منطقه طارم با علایمی مانند قهوه ای شدن آوندی برای جداسازی قارچ بر روی محیط کشت اختصاصی Czapec dox agar در دمای 24 درجه سانتی گراد و شرایط تاریکی در انکوباتورکشت داده شدند. در ادامه نهالهای پنج ماهه ارقام زرد (بومی طارم)، آبلونکا و کرونایکی به روشRoot dipتلقیح گردیدند. نمونه برداری از قسمت ریشه در 8 زمان متفاوت پس از آلوده سازی انجام شد. استخراجDNA از ورتیسلیوم رشد یافته بر روی محیط مایعPDBو همچنین از ریشه نهالهای تلقیح شده و شاهد انجام گرفت. روند افزایش تدریجی میزانDNAقارچ موجود در نهالها با استفاده از تکنیکReal-time PCRو به کارگیری سیستمSybr Greenهمراه با آغازگرهای اختصاصی کمیت سنجی گردید. نتایج بررسیها نشان داد که ابتدا رقم زرد سپس رقم آبلونکا با توجه به بالا بودن غلظتDNAقارچ در کلDNAاستخراج شده در فواصل زمانی معین بعد از تلقیح به ترتیب حساسیت بیشتری نسبت به رقم کرونایکی در برابر بیماری دارند و کرونایکی از دو رقم دیگر مقاوم تر است.