کلونینگ و سکانس ژن HAO3 کنه Hyalomma Anatolicum Anatolicum در شاتل وکتور ترشحی pPICZαA

هدف: هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم Anatolicum Anatolicum Hyalomma – گونه ای از کنه های سخت - انگل حیوانات اهلی و وحشی در مناطق گرم و نیمه گرم جهان است . یکی از مهم ترین بیماری های منتقل شونده توسط کنه های هیالوما، تب هموراژیک کریمه – کنگو (CCHF ) است که هیالوما آناتولیکوم یکی از مهمترین ناقلان آن است . به منظور ایمنی وسیع علیه واریته های مختلف این گونه ، اخیرا ژن HAO3 هیالوما مورد توجه محققان قرار گرفته است . مواد و روش کار: در این تحقیق ORF ژن HAO3 کنه هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم به کمک دو پرایمر اختصاصی که دارای سایت های برشی برای آنزیم های XbaI و ECORI بودند و با استفاده از تکنیک مولکولی PCR تکثیر گردیده و در وکتور بیانی pPICZαA قرار داده و در باکتری E.Coli DH5α کلون گردید . سپس وکتور نوترکیب به کمک هضم آنزیمی ، تکنیک مولکولی و تعیین توالی ، تایید گردید . نتایج و بحث : مقایسه توالی نوکلئوتید این ژن و توالی اسید آمینه حاصل از آن با توالی ثبت شده در بانک اطلاعاتی ژنی نشان داد، این ژن با تمام ایزوله ها از تیپ های HAO3 ؛ BM86 و HA86 تشابه بسیار بالایی دارد و با بیان این ژن در مخمر یوکاریوتی پیکیا پاستوریس ، می توان پروتئین حاصله را به عنوان کاندیدای مناسب جهت واکسن نوترکیب علیه کنه هیالوما مطرح نمود .

کلیدواژه ها:

کلونینگ ، سکانس ، هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم ، ژن HAO3 ، تکنیک مولکولی PCR ، هضم آنزیمی ، وکتور بیانی pPICZαA