بررسی امکان خاموش سازی ژن PDS به روش VIGS در گیاه تنباکوی زینتی

خاموش سازی ژن القاء شده توسط ویروس VIGS یک روش خاموش سازی ژن پس از رونویسی PTGS است و به عنوان یک مکانیسم دفاعی، میتواند از گیاهان در برابر ویروس های مهاجم حفاظت کند. این راهبرد دفاعی گیاه، برای توسعه ی روشی جهت خاموش سازی ژن های هدف درون زاد مورد بهره برداری قرار گرفته است. جهت خاموش سازی یک ژن خاص، یک قطعه از ژن هدف درون یک حامل ویروسی تغییریافته، همسانه سازی شده و به گیاه منتقل میشود. ژن فایتویین دی سچوریز PDS یک آنزیم محدودکننده ی سرعت در مسیر بیوسنتز کاروتنوییدها را کد میکند. بنابراین خاموش سازی این ژن، سطح بیان را کاهش میدهد و روی محتوای کاروتنوییدی سلول اثر میگذارد و در نهایت منجر به فنوتیپ ظاهری سفیدشدگی نوری میشود. در این پژوهش به منظور بررسی امکان انجام VIGS برای خاموش سازی ژن نشانگر PDS از فناوری خاموش سازی همولوگ استفاده شد. گیاهانی که سازه ی خاموشی به آنها تزریق شده بود، پس از حدود 10تا12 روز، علایم سفید شدگی نوری را بروز دادند. نتایج بدست آمده بیانگر کاهش میزان بیان ژن PDS مقدار کلروفیل ها و کاروتنوییدها در برگ گیاهان تیمار شده نسبت به گیاه شاهد کنترل منفی بود. این اولین گزارش در مورد خاموش سازی ژن به روش VIGS در گیاه تنباکوی زینتی میباشد و میتواند ابزار مفیدی برای بررسی عملکرد ژن های هدف برای مهندسی این گیاه باشد.

کلیدواژه ها:

ناقل ویروسی TRV ، اگروباکتریوم ، همسانه سازی ، بیان نسبی ژن Real-Time PCR