سنتز وکلونینگ cDNA ی نوترکیب VEGF-111b و نقش آن در درمان سرطان پستان

رگ زایی در حالت های فیزیولوژیک مثل تکامل جنینی، چرخه تولیدمثل، بهبود زخ مها و حالت های پاتولوژیک مثلایسکمی ها، دیابت و سرطان نقش دارد VEGF. یکی از مهم ترین تنظی مکننده های اختصاصی رگ زایی بوده و شامل هفت نوع گلیکوپروتیین ترشحی م یباشد. در این میان VEGF-A فاکتور اصلی در فرایند رگ زایی محسوب شده و شامل انواعی از ایزوفرم ها با ویژگی های بیولوژیکی متمایز می باشد. فرآیند پیرایش در mRNA ژن VEGF-A منجر به ایجاد ایزوفرم های القا کننده رگ زایی (VEGF-xxx) و ایزوفرم های ضد رگ زایی (VEGF-xxxb) می گردد. آنژیوژنز نقش مهمی در رشد و پیشرفت سلو لهای سرطانی و متاستاز سرطان پستان داشته و به عنوان یک فاکتور پیش بینی کننده بقا فرد مبتلا مطرح می گردد VEGF-A. یکی از فاکتورهای بسیار موثر در آنژیوژنز سرطان پستان بوده و بسیاری از مطالعات نشان دهنده افزایش بیان ایزوفر مهای القا کننده ر گزایی این ژن و کاهش بیانایزوفرم های ضد ر گزایی در تومورهای پستان می باشند. بنابراین بسیاری از مواد ضد ر گزایی مثل ایزوفرم های VEGF-xxxb به عنوان راهکارهای درمانی جدید در ارتباط با سرطان پستان مطرح می گردند b111VEGF. یکی از جدیدترین انواع ایزوفرم های VEGF-A بوده که توسط پلاسمین تجزیه نمی شود و نسبت به هضم پروتیولیتیکی توسط سرین پروتیازها مقاوم می باشد. ایزوفرم b111VEGF شامل توالی اگزون های 4-1 و b8 می باشد. در این مطالعه cDNA ی نوترکیب VEGF111 تولید شده از طریق واکنش PCR و طراحی پرایمرهای ویژه، طی واکنش ligation در وکتور pBudCE4.1 کلون گردید. در واقع، پس از هضم آنزیمی وکتور و cDNA ی نوترکیب VEGF111 با استفاده از آنزیم های محدودالاثر ویژه، آنزیم لیگاز به مخلوط واکنش افزوده شد. در مرحله بعد مخلوط واکنش، به مدت یک شب در دمای 22 درجه سانتی گراد قرار گرفت. در انتها، از طریق ترانسفورماسیون وکتور حاوی VEGF111 نوترکیب به باکتری E.coli انجام فرآیند کلونینگ مورد تایید قرار گرفت. امید است در آینده نزدیک این فاکتور نوترکیب به عنوان پنجره ای منحصر به فرد از فرصت ها در درمان سرطان پستان مطرح گردد.