فنآوری سیستم های دورگ - دوتایی و سه تایی مخمری و کاربردهای آن

کلید بسیاری از فرآیندهای بیولوژیکی سلولی مانند همانندسازی دی ان ای، رونویسی، ترجمه، تنظیم چرخه ی سلولی، تشکیل ساختارهای سلولیو مجموعه های آنزیمی، برهمکنش های فیزیکی بین پروتئین ها است. از آنجا که واکنش پروتئین-پروتئین برای همه فرآیندهای سلولی ضروریاست، گاهی ممکن است عمل یک پروتئین ناشناخته به وسیله تعیین پروتئین هایی که با آن واکنش می دهند، شناسایی شود. برهمکنش بینپروتئین های مختلف ویروسی و پروتئین های شناخته شده در میزبان های گیاهی به منظور ایجاد آلودگی ضروری می باشد. از این رو تعیینبرهم کنش مستقیم بین پروتئین های ویروسی و میزبان یکی از رهیافت های مهم و اساسی در ویروس شناسی گیاهی به شمار می رود. سیستمدورگ دوتایی مخمری سیستمی است که واکنش بین دو پروتئین را به وسیله ساخت مجدد یک عامل رونویسی فعال در شرایط آزمایشگاهیتعیین می کند. فعال کردن رونویسی ممکن است به وسیله بیان مستقل دو زنجیره، به صورت سازه های تولیدکننده ی پروتئین هایی که با همدیگربه صورت درون زیوه ای واکنش میدهند، صورت گیرد. یک سازه دارای زنجیره اتصال به دی ان ای ترکیب شده با اولین پروتئین مورد نظر (DB-X یا طعمه) و دیگری یک زنجیره فعالکننده در ترکیب با پروتئین دوم (AD-Y یا صید یا پروتئین هدف) است. واکنش بین DB-X و AD-Yبه ساخت عامل رونویسی و در نهایت منجر به فعال شدن ژن گزارشگر می شود. هم کنش های میان آرانای و پروتئین ها نیز برای انجام طیفوسیعی از برهم کنش های سلولی نقش عمده ای دارد. یکی از روش های عمده در شناسایی این هم کنش ها روش دورگ سه تایی مخمری میباشد.این رویکرد حاصل تغییراتی در روش دو رگ دوگانه میباشد که در نتیجه ی اتصال یک پروتئین متصل شونده به آرانای به پروتئین طعمه انجاممیشود. در صورتیکه آرانای طعمه به صید متصل شود، ترکیبی سه قسمتی شامل طعمه، صید و قلاب به وجود میآید که باعق فعال شدندامانه ی AD و در نهایت بیان ژن گزارشگر می شود. امروزه سیستم دورگ دوتایی و سه تایی مخمری را به عنوان یک ابزار مناسب برای تعییننقشه واکنش های پروتئینی سلول، در نظر گرفته اند. این نقشه ممکن است شامل واکنش های پروتئینی باشد که در طول زندگی یک موجودزنده روی می دهد.

کلیدواژه ها:

برهمکنش های پروتئین-پروتئین ، مخمر ، رونویسی ، مجموعه های آنزیمی ، بیماری شناسی گیاهی