تمایز سلول بنیادی مزانشیمی مشتق شده از اندومتر رحم انسان به سلول های شبه عصبی با استفاده از کاندوئیت پلی اکریلونیتریل/کیتوزان

مقدمه: آسیب های عصبی یکی از ضایعات رایج در انسان محسوب می شوند. از پیشرفته ترین روشهای جبران عوارض عصبی استفاده از مهندسی بافت عصبی است. در مهندسی بافت با استفاده از سلول های بنیادی می توان اجزای قابل پیوند ایجاد کرد که در بازسازی یا بازگردانی عملکرد، کاربرد دارند. در مهندسی بافت، استفاده از کاندوئیت ها در کنار سلول های بنیادی اهمیت فراوانی دارند. کاندوئیت ها به عنوان بستری برای اتصال، مهاجرت و تمایز سلولی در بافتی که در حال تشکیل است عمل می-کنند. داربست ها انواع مختلفی از جمله طبیعی و مصنوعی دارند. یکی از روش های نوین تهیه داربست می توان روش الکتروریسی را نام برد.هدف: هدف از مطالعه حاضر تهیه کاندوئیت پلی اکریلونیتریل/کیتوزان و بررسی تمایز عصبی سلول بنیادی مزانشیمی مشتق شده از اندومتر رحم انسان در آن می باشد.مواد و روش ها: در این مطالعه کاندوئیت پلی اکریلونیتریل(PAN) با استفاده از روش الکتروریسی ساخته شد. سلول های بنیادی مزانشیمی از بافت آندومتر رحم انسان (EnMSCs) استحصال و با استفاده از فلوسایتومتری(مارکر های مثبت CD۱۵۰, CD۹۰, CD۷۳ و مارکرهای منفی CD۳۵,CD۴۵) و بررسی پتانسیل تمایزی به سلول های چربی و استخوانی تایید شد. سپسEnMSCs در ژل کیتوسان تعبیه و در کاندوئیت کشت شده و با استفاده از FGF و EGF و فاکتور B۲۷ به مدت ۱۴ روز به سلول های شبه عصبی تمایز داده شدند. برای بررسی کیفیت داربست از میکروسکوپ الکترونی (SEM) و از رنگ آمیزی آکریدین اورنج و DAPI برای کیفیت استقرار سلول روی کاندوئیت استفاده گردید. تمایز سلول ها با استفاده از روش qRT-PCR و ایمونوسیتوشیمی بررسی شد.نتایج: در این مطالعه نشان داده شد که الکتروریسی پلیمر PAN روشی مناسب جهت ساخت کاندوئیت بوده و EnMSCs با تعداد و زنده مانی بالایی بر این کاندوئیت اتصال یافته و می توانند تحت شرایط مناسب بر این پلیمر زیست سازگار رشد و تمایز یابند. همچنین EnMSCs تحت تاثیر فاکتورهای تمایزی و حضور کیتوسان با بازده معنی داری به سلول های شبه عصبی تمایز یافتند که بیان مارکرهایی مانند Nestin, Map۲, Tuj-۱ و NF تایید کننده القای عصبی در این سلول ها بود.نتیجه گیری: نتایج این مطالعه گام کوچکی در استفاده از مهندسی بافت عصبی به منظور جبران و درمان عوارض عصبی از جمله آسیب های نخاعی و آسیب های اعصاب محیطی خواهد بود.

کلیدواژه ها:

سلول های بنیادی آندومتر انسان ، تمایز عصبی ، مهندسی بافت عصب ، کاندوئیت ، پلی اکریلونیتریل.