تعیین ویژگی هیدروکسیلاسیون استروئید یک سویه صنعتی Aspergillus TCCC41060 ochraceus توسط ژن CYP68J5 سیتوکروم P450

هدف: استفاده از Aspergillus ochraceus TCCC41060 برای سنتز 11 آلفا- هیدروکسید- اتیل گونندیون به عنوان یک واسطه مهم برای سنتز دزوژسترول که یک ترکیب اصلی داروهای ضدبارداری خوراکی نسل سوم است، بدلیل فضاگزینی کم هیدروکسیلاسیون آن منع می شود. در مطالعه حاضر، ژن یا ژن های به کاررفته در ویژگی هیدروکسیلاسیون استروئیدی در سویه TCCC41060 را مشخص خواهیم کرد. روش ها: با بهره گیری از این واقعیت که بیان 11 آلفا- هیدروکسیلاز که عضوی از خانواده سیتوکروم P450 است و تا حد زیادی تحت تأثیر لایه های استروئیدی قرار می گیرد، ما RNA-seq )qRT-PCR و بیان عملکرد مخمر را برای جستجوی ژن یا ژن های مسئول هیدروکسیلاز استروئیدی ترکیب کردیم. نتایج: دو ژن بسیار القاپذیر CYP68L8) P450 و CYP68J5) جدا شده و نوترکیب سلول های مخمر، بیان کننده CYP68J5 قادر به هیدروکسیلاسیون 11 آلفا، 16 و 17 آلفا- اپوکسی پروژسترون و دی اتیل ژونندیون بودند. اختلال در CYP68J5 در سویه TCCC41060 منجر به از دست دادن کامل فعالیت های هیدروکسیلاسیون به سمت دی اتیل گونندیون می شود، که نشان می دهد CYP68J5 تنها مسئول فعالیت هیدروکسیلاسیون دی اتیل گونندیون در TCCC41060 است. بحث: نتایج بالا نشان می دهد که ویژگی کم هیدروکسیلاسیون CYP68J5 در دی اتیل گونندیون به طور کامل برای محتوای بالای محصول در TCCC41060 به حساب می آید، بنابراین به یک استراتژی برای ساخت انواع 11 آلفا- هیدروکسیلاز با هیدروکسیلاسیون بالا اشاره می شود.

کلیدواژه ها:

، )ochraceus Aspergillus ، استروئید ، هیدروکسیلاز ، سیتوکروم P450 ، دی اتیل گونندیون ، گلوکوکورتیکوئیدها