ارزیابی سلامت درختان میوه هسته دار مادری نسبت به بیماری پژمردگی ورتیسلیومی براساس استانداردهای مصوب برای صدور گواهی سلامت

بیماری پوسیدگی دماتوفورایی یا پوسیدگی سفید ریشه با عامل Rosellinia necatrix یکی از بیماری های مهم سیستم ریشه در میزبان های مختلف (گیاهان زراعی ، علف های هرز،درختان میوه، درختان غیر مثمر) به شمار می رود. این بیماری در دنیا بر روی درختان میوه هسته دار و دانه دار به ویژه سیب به شکل یک مشکل رو به گسترش مطرح می باشد. بر اساس استاندارد ملی سلامت، باغات پیش گواهی یا مادری باید عاری از این بیماری باشند. همچنین نهالستان گواهی شده درختان میوه نیز باید عاری از پوسیدگی دماتوفورایی باشد. درسال اول اجرای این تحقیق جهت دستیابی به جدایه بیمارگر به عنوان کنترل مثبت ازباغات قدیمی در استان های اصفهان، مرکزی،گیلان،کرمانشاه و خراسان رضوی نمونه برداری شد. ریشه های نمونه برداری شده در آزمایشگاه پس از شستشو و ضدعفونی سطحی بر روی محیط های کشت PDA، MEA، WA کشت داده شد. از چهار نمونه ریشه قارچ عامل بیماری پوسیدگی رزلینایی جدا و پس از آن با روش نوک ریسه خالص سازی شد. آزمایش بیماریزایی جدایه های به دست آمده بر روی بوته های باقلا به عنوان میزبان حساس انجام شد. پس از استخراج DNA از پرگنه قارچ، تکثیر باند اختصاصی 500 جفت بازی با آغازگرهای مبتنی بر ITS( R2/R8 ) بهینه سازی شد. پایه های رویشی M106، M11و Pyd با زادمایه جدایه بیماریزا مایه زنی شد. جهت بهینه سازی ردیابی زود هنگام آلودگی در نهال، پس از تهیه زاد مایه قارچ بر روی دانه های گندم، پایه های رویشی M106، MM111 و PyroDwarf در گلخانه مایه زنی شدند. پایه های مورد آزمون از نظر ظهور علایم هوایی متفاوت بودند. در فواصل زمانی 1، 2 و 3 ماه پس از مایه زنی از ریشه نهال های مورد آزمون نمونه برداری شد. 3 ماه پس از مایه زنی آلودگی به بیمارگر در ریشه های فرعی بدون علایم به کمک آزمون PCR ردیابی شد. در حالی که این آلودگی بر روی محیط کشت قابل ردیابی نبود.