گزارش بررسی وجود یک ژن ، پس از پاساژ در باکتری استافیلوکوکوس آرئوس به روش PCR

هدف: در یک مطالعه ی اپیدمیولوژی-مولکولی برای بررسی وجود ژن های متیلاز ، سه گروه از genes erm ، که عامل ایجاد مقاومت به آنتی بیوتیک های دو خانواده ی ماکرولید و لینکوزامید هستند، در یک نمونه که حاوی یکی از ژن های مقاومت بود ، بعد از پاساژ ، ژن مربوطه وجود نداشت . برای بررسی درصد احتمال وقوع در دیگر نمونه های مثبت ، ده نمونه ی دیگر نیز مورد پاساژ قرار گرفت و وجود ژن مربوطه به روش PCR ارزیابی شد . مواد و روش کار: نمونه های استافیلوکوکوس آرئوس جمع آوری شده از ورم پستان های بالینی و تحت بالینی بود که پیش از شروع مطالعه مورد آزمایش های بیوشیمیایی و میکروبی معمول برای تشخیص ، قرار گرفته بودند. DNA ده نمونه ی مثبت پاساژ مجدد داده شده و همگی به روش قبلی مورد استخراج قرار گرفتند . برای بررسی صحت روش کار از یک نمونه کنترل مثبت صنعتی (S.aureus RN4220) و همچنین باکتری های موجود در پلیت اولیه ی نمونه های انتخاب شده هم استفاده شد . PCR ، برای شناسایی ژن مربوطه ، دقیقا با همان روش استاندارد قبلی بر روی پاساژ خورده ها انجام شد . نتایج و بحث : در بررسی محصولات PCR نمونه های مورد مطالعه (P2) ، بر روی ژل آگارز ، تنها در دو نمونه از باکتری های پاساژ جدید ، قطعه مورد نظر وجود داشت و در هشت مورد از آن ها ، هیچ باندی در الکتروفورز محصول PCR دیده نشد. تمامی نمونه های اولیه و همچنین سوش استاندارد کنترل مثبت صنعتی ، هیچ تفاوتی را نشان نداده و همگی مثبت بودند. با توجه به رشد مطالعات مولکولی و اهمیت کاربردی آن ها، توجه به عدم پاساژ نمونه های مورد نظر برای مطالعه در آزمایشگاه ها و سعی در بررسی ژن ها از نمونه اصلی و یا حداکثر پاساژ اول (P1) در کنار استفاده از نمونه های استاندارد صنعتی کنترل مثبت ، با توجه به نتایج مطالعه ی فوق ضروری می نماید .

کلیدواژه ها:

PCR ، erm genes ، باکتری استافیلوکوکوس آرئوس ، پاساژ نمونه ، الکتروفورز