تعیین گونه های تیلریای گوسفندی با استفاده از روش Nested-PCR RFLP در شهرستان ارومیه

بیماری تیلریوز یکی از معضل های مهم پیشرفت در صنعت دامداری در اکثر نقاط جهان میباشد. برخی از گونه های تیلریا از جمله تیلریا لستوکاردی، خسارات اقتصادی زیادی را به دنبال دارد. استان آذرباییجان غربی یکی از قطب های مهم دامپروری بویژه در زمینه پرورش گوسفند در ایران است. تا کنون مطالعه ای جامع راجع به تیلریوز گوسفندی در این منطقه صورت نگرفته است. در این مطالعه به منظور تعیین گونه تیلریوز گوسفندی، تعداد 50 نمونه خون از مناطق مختلف ارومیه بصورت تصادفی جمع اوری شد. گسترشهای خون با محلول گیمسا رنگ آمیزی شده از نظر حضور پیروپلاسم تیلریا مورد بررسی میکروسکوپیک قرار گرفت. همچنین درصدپارازیتمی پس بررسی 200 شان میکروسکوپی تعیین گردید. استخراج DNA با استفاده از کیت )MBSTایران) انجام شد. پس از تکثیر منطقه بسیار متغییر ژن rRNA18 تیلریا با استفاده از روش مولکولی nested-PCR ،این گونه مورد شناسایی قرار گرفت. سپس با روش RFLP با استفاده از انزیمهای محدود کننده Hpa2، Bsh12851 وRsa1 گونه های مختلف مورد ارزیابی قرارگرفت. در بررسی میکروسکوپیک تمامی گسترش های خونی از نمونه ها از نظر پیروپلاسم های تیلریا منفی بود. اما با استفاده از nested-PCR، 10 درصد (5/50) از نمونه ها مثبت بود. بر اساس نتایج RFLP، تنها گونه تیلریا اویس مورد شناسایی قرار گرفت.

کلیدواژه ها:

تیلریوز گوسفندی ، ارومیه ، nested-PCR RFLP