تشخیص تفریقی ویروسهای گامبورو واکسینال از بیماری زا با آزمایشهای پاراکلینیکی مولکولی

بیماری بورس عفونی (IBD)از بیماریهای حاد ویروسی بسیار مسری جوجههای جوان است که بافت لنفاوی بخصوص بورس فابرسیوس پرنده را بعنوان نخستین موضع هدف مورد تهاجم قرار میدهد. عامل بیماری گامبورو سروتیپ یک Avibirna virus از خانواده Birnaviridae است. این ویروس با اندازه 55-65 نانومتر، دارای ژنوم دو رشتهای RNA تقارن بیست وجهی، فاقدپوشش میباشد. بیماری بورس عفونی بسته به سن گله مبتلا به دو شکل بالینی تحت بالینی ظاهر میشود. برای آزمایش شاخص وزن بورس به بدن (Bursa-Body Index Test)، سه گروه ده تایی جوجه SPF هفت روزه در نظر گرفته شد (شاهد، واکسینه تلقیح شده با ویروس حاد) پس از چهارده روز، ابتدا جوجهها توزین شده، سپس بورس فابرسیوس آن ها برداشت شد. بورسها وزن شده نسبت وزن بورس به وزن بدن محاسبه شد. برای آزمایش هیستوپاتولوژی (Histopathology Test)، بورس جوجه ها برداشته شده پس از فیکس کردن در پارافین، مقاطع بافتی با هماتوکسیلین ایوزین رنگ آمیزی شده مورد بررسی قرار گرفتند. در آزمایش RT-PCR با پرایمرهای اختصاصی منطقه hypervariable ژن VP2، قطعه bp 743 تکثیر شد. محصول PCR با آنزیمهای محدودگر BstNI MboI هضم روی ژل آگارز الکتروفورز شد. در آزمایش شاخص وزن بورس به بدن، نسبت وزن بورس فابرسیوس به بدن در گروه تلقیح شده با ویروس حاد (B.B.Index =0/94) 0/48، در گروه واکسینه (B.B.Index =0/39) 0/21 ودر گروه شاهد 0/53 بدست آمد. در آزمایش هیستوپاتولوژی، بیش از %90 فولیکولها در نمونه های واکسینه سالم بودند. درجه هیستوپاتولوژی ((HG کمتر از بدست آمد در تعداد کمی از آنها کاهش لنفوسیت دیده میشد. در نمونه تلقیح شده با ویروس حاد، در اکثر فولیکولها ضایعه نکروزی کاهش شدید لنفوسیتها دیده میشد HG بیش از بدست آمد. نتیجه هضم آنزیمی نشان داد که اگر با آنزیم BstNI در مناطق 154، 172 209 با آنزیم MboI در مناطق 229 382 باند مشاهده شود، ویروس مورد نظرواکسینال در غیر اینصورت بیماری زا خواهد بود. نتایج نشان داد که با آزمایش های فوق می توان ویرو های گامبورو غیر بیماری زا را از بیماری زا تشخیص تفریقی داد.

کلیدواژه ها:

ویروس گامبورو ، تشخیص تفریقی ، شاخص وزن بورس به بدن ، PCR/RFLP ، هیستوپاتولوژی