جداسازى و شناسایى سویه تولید کننده آنزیم فسفولیپاز از پساب صنعت روغن و جهش آن

در پژوهش حاضر گونه هاى مختلف تولیدکننده آنزیم فسفولیپاز، از پساب صنعت روغن جداسازى و در نهایت سویه قارچى Tricoderma atroviride ZB-ZH 192 شناسایى و جهت ادامه بررسى ها انتخاب گردید. جهت افزایش میزان فعالیت آنزیم، سویه منتخب تحت جهش تصادفى توسط پرتودهى با اشعه گاما در دزهاى 200، 400، 600 و 800Gy قرار گرفت. مقایسه میزان فعالیت آنزیم سویه جهش یافته با نوع وحشى نشان داد که دز 400Gy اشعه گاما سبب ایجاد جهش پایدار همراه با افزایش میزان فعالیت فسفولیپاز و توده زیستى، به ترتیب از 1/96 به 3U/mL و از 8/13g/L به 13/17g/L شده است. به منظور غربالگرى و بررسى اثر فاکتورهاى مختلف بر میزان توده زیستى و فعالیت فسفولیپاز سویه جهش یافته منتخب، از طرح پلاکت-برمن با هفت متغیر دما، زمان، میزان فسفولیپید سویا به عنوان منبع کربنى، میزان پپتون به عنوان منبع نیتروژنى، نسبت مساوى از منو و دى پتاسیم هیدروژن فسفات به عنوان منبع فسفر، درصد تلقیح و سن تلقیح، در دو سطح، توسط نرم افزار JMP استفاده گردید. نتایج نشان داد که سطوح بالاى متغیرهاى زمان، دما و فسفولیپید سویا به عنوان منبع کربنى اثر معنى دارى بر میزان فعالیت آنزیمى داشتند، در حالى که متغیرهاى میزان پپتون به عنوان منبع نیتروژنى و زمان، بر تولید توده زیستى تاثیر معنى دار نشان دادند.

کلیدواژه ها:

فسفولیپاز ، Tricoderma atroviride ، اشعه گاما ، طراحى پلاکت-برمن ، فعالیت آنزیمى ، توده زیستى