خالص سازی آنزیم گلوتاتیون S ترانسفراز از نمونه گاماروس دریای خزر به روش کروماتوگرافی

گلوتاتیونSترانسفراز ها گروهی از آنزیم های چند عملکردی هستند که در سم زدایی گزنوبیوتیک های مختلف در پستانداران و سایر موجودات اهمیت زیادی دارند و با اضافه کردن گروه تیول از گلوتاتیون به گزنوبیوتیک های الکتروفیل می توانند از سلول ها در برابر عوامل جهش زا، سرطان زا و اثرات سمی ترکیبات دفاع کنند. ساختار و عملکرد این آنزیم در گروه بزرگی از گونههای بیمهرهبررسی شده است. این بررسی ها وجود ارتباط بین فعالیت آنزیم GST و تحمل این ارگانیسمها را نسبت به ترکیبات خارجی نشان می دهند.گاماروس از جمله بی مهرگانی است که به طیف گسترده ای از آلاینده ها حساس استو برای تشخیص آلاینده های محیطی مناسب می باشد. با توجه به فعالیت بالای این آنزیم در گاماروس و همچنین دسترسی به نمونه گاماروس سواحل دریای خزر به عنوان یک مدل آزمایشگاهی، آنزیم گلوتاتیونSترانسفراز را از گاماروس استخراج کردیم و پس از رسوب دهی با نمک آمونیوم سولفات با استفاده از ستون کروماتوگرافی ژل فیلتراسیونخالص سازی آنزیم انجام گرفت. بعد از هر مرحله میزان پروتیین موجود به روش برادفورد و همچنین فعالیت آنزیم با استفاده از روشHabig و همکارانش بررسی شد. با توجه به نتایج به دست آمده،بعد از عبور دادن نمونه از ستون کروماتوگرافی غلظت پروتیین موجود در نمونه از 6,45 میلی گرم در میلی لیتر به 0,054 میگرم در میلی لیتر کاهش یافت اما فعالیت ویژهآنزیم به بیش از دو برابر نمونه اولیه افزایش یافت.این آزمایش با هدف خالص سازی آنزیم گلوتاتیونSترانسفراز از نمونه گاماروس دریای خزر انجام گرفت نتایج بدست آمده از افزایش میزان فعالیت آنزیم در غلظت های پایین پروتیین نشانگر حصول نتیجه مورد نظر است.

کلیدواژه ها:

خالص سازی ، آنزیم ، گلوتاتیون S ترانسفراز ، گاماروس ، ژل فیلتراسیون