تمییز آلل های MHC سگ DLA-DRB1 با روش تحلیل دقیق دمای شکافت DNA

مقدمه: نقش مهم مولکولهای مجتمع عمده پذیرش بافتی (MHC (اتصال به پپتیدهای پادگنی و عرضه آنها به لنفوسیتهای T است. از اینرو تنوع MHC با حساسیت و یا مقاومت در برابر بسیاری از بیماریهای عفونی و بیماریهای خودایمن مرتبط است. یک روش نوین بررسی تنوع ژنتیکی، تحلیل دقیق دمای شکافت (HRM-Melting Resolution High (DNA است که می توان آنرا برای بررسی تنوع MHC به کار برد. هدف از مطالعه حاضر تمییز آلل های MHC سگ (DRB1-DLA (با روش تحلیل دقیق دمای شکافت DNA بوده است. روش کار: تعداد 38 نمونه خون از سگ های ارجاعی به بیمارستان دامهای کوچک دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران جمع آوری گردید. پس از ا ستخراج DNA و افزوده سازی اگزون دوم ژن DRB1-DLA ،تحلیل HRM و منحنی ذوب صورت گرفت. برای تطبیق الگوهای HRM با توالی نوکلیوتیدی آللها، از روش تعیین توالی مستقیم استفاده شد. بحث و نتیجه گیری: بر ا ساس تنوع م شاهده شده در نتایج HRM و منحنی ذوب، نمونهها به 6 ژنوتیپ (A تا F (قابل تق سیمبندی بودند. بی شترین فراوانی مربوط به ژنوتیپ C) 58/31 (% و سپس ژنوتیپ D) 69/23 (% بود. در مجموع 58/81 % نمونه ها هتروزیگوت و 42/18 % نمونه ها هوموزیگوت بودند. مطالعه حاضر اولین مطالعهای ا ست که برای تایپیگ آللهای ژن DRB1-DLA از تکنیک HRM ا ستفاده شده ا ست. تطبیق نتایج HRM با توالی آللها نشان داد که این روش میتواند برای تفکیک آللهای DRB1-DLA به کار رود.

کلیدواژه ها:

مجتمع عمده پذیرش بافتی ، سگ ، DRB1-DLA ، تحلیل دقیق دمای شکافت