بررسی مولکولی وقوع عفونتهای تنفسی ناشی ازمایکوپلاسما مایکوئید زیرگونه مایکوئیدس کلونی کوچک و بزرگ در گاو، گوسفندوبزنژادایرانی

عفونتهای تنفسی مایکوپلاسمایی،موجب خسارات اقتصادی فراوان در نشخوارکنندگان بخصوص در منطقه آفریقا وخاورمیانه میشود . با اینکه تشخیص صحیح گونه های مایکوپلاسما در تعقیب استراتژی بهبود وضعیت بهداشتی و مدیریتی درفیلد نقش مهمی ایفا می کند،ولی با این وجود تشخیص تفریقی علائم بالینی عفونتهای مایکوپلاسما یی از سایر عوامل مشابه بسیارمشکل است . این تحقیق شامل مطالعات مولکولی و میکروبیولوژیکی برای تشخیص مایکوپلاسما مایکوئیدس زیرگونه ایکوئیدس کلونی کوچک وبزرگ در ریه های پنومونیک گاو،کوسفند و بز می باشد . تعداد 180 نمونه ریه مشکوک از کشتارگاهی در کرمانشاه،غرب ایران،در طول سال 1384-1386 جمع آوری ودر مجاورت یخ به آزمایشگاه دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران وانستیتوی تحقیقاتی رازی منتقل شدند . نمونه های ریه بر اساس ویژگی های رنگ،قوام،و سطح مقطع بررسی شدند . ضایعات ماکروسکوپی شامل هپاتیزه شدن ریه با زخمهای سفیدو خاکستری و ظاهر منقوط دارای فیبرین یا بدون آن بودند . برای هر نمونه ابتدا بافت ریه راخرد کرده و با بکارگیری فیلتراستات سلولز 0/45 – 2/5 میکرومتر، به محیط کشت مایع ) PPLO شرکت (DIFFCO افزوده شدند . نمونه ها به انکوباتور %6/8 دی اکسید کربن منتقل PPLO روز ، لوله های کشتی که زردرنگ شده بودند در پلیت های محیط کشت 10-14 شدند . پس از آگارساب کالچر داده شدند . پس از مشاهده، کلونی های ویژه مایکوپلاسما در سطح آگار،استخراج DNA بر اساس روش فنل انجام گردید . DNA استخراج شده همراه با %5 گلیسرول، در -20 درجه نگهداری شد . روش PCR براساس 16 SrRNA بر روی DNA استخراج شده با استفاده از پرایمراخنصاصی جنس و گونه انجام شد و آمپلی کن های بوجودآمده 573 bp بودند . تعداد 40 نمونه از مجموع 180 نمونه ریه با روش PCR از جهت جنس مایکوپلاسما مثبت بودند ).22/2%) در صورتیکه در نتیجه کشت تنها 30 نمونه مثبت شدند ).16/6%) هیچ تفاوت معنی داری از نظر سن و جنس در مبتلایان مثبت مشاهده نگردید . بیشترین درصدزمان ابتلا به عفونت درماه آذر (32%) و کمترین آن در ماه مرداد (2/5%) بوده است .