تشخیص و آنتی بیوگرام استافیلوکوکوس ارئوس در نمونه های شیر غیر پاستوریزه استان تهران به روش Multiplex PCR و مقایسه با کشت میکروبی

باکتری استافیلوکوکوس ارئوس از شایع ترین باکتری های عامل ورم پستان می باشد که جهت تشخیص تعداد کم آن در شیر نیاز به روش های حساس می باشد. در این مطالعه روش از واکنش زنجیره ای پلیمراز برای تشخیص ژن های تولید کننده توکسین های SEC, SEB, SEA که مختص گونه ارئوس بوده و همچنین ژن حراست شده 23SrRNA که در تمام استافیلوکوک ها مشترک می باشد، استفاده شده است. در نهایت نتایج حاصل از تشخیص مولکولی با روش مرسوم کشت مورد مقایسه قرار گرفته است. به دلیل سختی دیواره باکتری استافیلوکوکوس و عدم تأثیر آنزیم های لایزوزیم، پروتئناز K و موتیلایزین، از روش ازت مایع جهت تجزیه دیواره باکتری استفاده گردید. تعداد 48 نمونه شیر غیرپاستوریزه از دامداری های حومه استان تهران تهیه و بعد از انجام PCR و کشت بر روی محیط آگارخون دار تعداد 4 نمونه مثبت تشخیص داده شد. نتایج حاصل از آنتی بیوگرام نشان داد که سیپروفلوکساسین، ریفامپین و جنتامایسن بهترین آنتی بیوتیک های انخابی در درمان اورام پستانی ناشی از استافیلوکوکوس طلائی می باشد. حساسیت روش مولکولی با تعداد 10 باکتری در هر میلی لیتر از محیط کشت درمدت زمان کوتاهی بدست آمد در حالیکه در روش کشت، تعداد 100 باکتری بعد از مدت 48 ساعت قبل تشخیص بود. بیان کننده آن است که روش مولکولی در مقایسه با روش های مرسوم حساس و بسیار سریع می باشد.

کلیدواژه ها:

استافیلوکوکوس ارئوس ، 23SrRNA ، Ses ، PCR