کاربرد پروتئین کوتاه شده هماگلوتینین ویروس سرخک جهت تولید واکسن نوترکیب

مطالعات گذشته حاکی از عملکرد محافظت کننده برخی اپی توپ های خطی در پروتئین هماگلوتینین ویروس سرخک می باشد. به همین منظور و جهت بررسی فعالیت بیولوژیکی یکی از این اپی توپ ها DNA مکمل توالی کد کننده پروتئین کوتاه شده H که واجد اپی توپ مذکور است تکثیر و تعیین توالی شد و سپس در سویه های مناسبی از باکتری E.coli کلون و بیان گردید. در مرحله نخست ژنوم ویروس سرخک از سلول های Vero آلوده شده به این ویروس جدا شد. در مرحله بعد دو سوم انتهای '5 ژن H توسط پرایمرهای طراحی شده حاوی سیگنال ترشحی، با بکارگیری واکنش RT-PCR تکثیر شد وپس از تایید از طریق روش توالی یابی در ناقلهای مناسب کلونینگ و بیانی استقرار یافت. در این مرحله سویه BL21 باکتری E.coli توسط ناقل بیانی و به منظور تولید پروتئین نوترکیب ترانسفورم شد و در نهایت ا ستفاده از روش ها ی تکمیلی نظیر Gel Scanning، SDS-PAGE و وسترن بلات به کمک آنتی بادی پلی کلونال ویروس سرخک حضور مقادیر مناسبی از پروتئین H کوتاه شده را نشان داد. با توجه به نتایج بدست آمده از این بررسی، کلون های تهیه شده پس از انجام آز مایشات تاییدی و از جمله خنثی سازی ، جهت تولید و گسترش واکسن نوترکیب ضد سرخک کاربرد خواهند داشت.

کلیدواژه ها:

ویروس سرخک ، واکسن نو ترکیب ، پروتئین کوتاه شده هماگلوتینین