بررسی انتقال ژن بتا گلوکورونیداز (GUS) به گل ژاله (Gerbera jamesonii cv. Royal Soft Pink) با استفاده از اگروباکتریوم

پژوهشی به منظور بررسی انتقال ژن بتاگلوکورونیداز (GUS) به گل ژاله (Gerbera jamesonii cv. ‘Royal Soft Pink’) از طریق هم-کشتی (Co-cultivation) ریزنمونه های (Explants) دمبرگ با اگروباکتریوم (Agrobacterium tumefaciens) نژاد EHA101 و دارای پلاسمید pIG121-Hm انجام شد. این پلاسمید دارای ژن های GUS و مقاوم به هایگرومایسین (hpt) و کانامایسین (npt II) بود. دو تا 3 روز از پس از هم-کشتی، ریزنمونه های دمبرگ با اگروباکتریوم، به محیط کشت MS دارای 4 میلی گرم در لیتر BA، یک میلی گرم در لیتر TDZ و 0/1 میلی گرم در لیتر IAA و 10 میلی گرم در لیتر هایگرومایسین و 10 میلی گرم در لیتر مروپنم تری هیدرات با هدف انگیزش مستقیم شاخساره (Direct shoot induction) انتقال یافتند. سپس شاخساره های تراریخت احتمالی، از ریزنمونه ها جدا شده و افزونگری آن ها در محیط کشت دارای 2 میلی گرم در لیتر BA و 0/2 میلی گرم در لیتر NAA و 10 میلی گرم در لیتر هایگرومایسین و 10 میلی گرم در لیتر مروپنم تری هیدرات بررسی شد. به منظور تایید گیاهان تراریخت (Transgenic) از آزمون رنگ آمیزی هیستوشیمیایی و واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) استفاده شد.

کلیدواژه ها:

ژن GUS ، گل ژاله ، باززایی مستقیم ، رنگ آمیزی هیستوشیمیایی