کلونینگ آپتامر YPASYMQ

آپتامرها الیگونوکلئوتیدهایی هستند ازRNA و DNAتکرشته ای یا مولکولهای پپتیدی که میتوانند به مولکول هدف با قدرت چسبندگی و اختصاصیت بالا باند شوند. این مولکولهای هدف میتوانند بیومولکولهای کوچک، پروتئینها و حتی سلولها باشند. آپتامرها در مقایسه با آنتیبادیها دارای مزایایی هستند که شامل تولید و طراحی آسان، اختصاصیت بالا و سهولت اتصال به مولکول هدف، ایمونوژن نبودن، پایداری و اندازه کوچک میباشند. آپتامرها به عنوان مولکولهای زیستی در تحقیقات بسیاری برای تشخیص به عنوان ابزار، درمان، پروبهای بیوسنسور، توسعهی داروهای جدید، سیستمهای انتقال دارو وجلوگیری از بیماریهای گیاهی استفاده میشوند.شانکر مرکبات از بیماریهای مرکبات است. این بیماری خسارت زیانباری را به مرکبات میرساند. آپتامر پپتیدیYPASYMQشناسایی شده از کتابخانه فاژی به روش بیوپنینگ نشان داده شده است که قابلیت اتصال به پروتئینpthAباکتریXanthomonas citri pv. citri (عامل شانکر باکتریایی) را دارد. این آپتامر پپتیدی ابتدا در وکتورpGEM-B1تهیه شد. وکتور از باکتریهای ترانسفورم شده استخراج شد و قطعه مورد نظر با استفاده از دو جایگاه برشیSacI و XbaIبه همراه ژن گزارشگرcMycدر ناقل بیانیpBI121حاوی پروموترCaMVجایگزین ژن گزارشگرGusAشد. از این سازهها میتوان جهت بیان این قطعه در گیاه میزبان عامل بیماری شانکر برای مطالعه اثر بازدارندگی آن رویpthAاستفاده نمود.

کلیدواژه ها:

آپتامر ، شانکر ، pthA