بیان پروکاریوتی ژن نوترکیب اسموتین توتون و تاثیر ضدقارچی آن بر قارچهای پاتوژن گیاهی

در این تحقیق ژن اسموتین گیاه توتون موجود در سازه بیانیpEAA-2در میزبانE. coli BL21(DE3 جهت بیان پروکاریوتی این پروتئین استفاده شد. بیان پروکاریوتی اسموتین انجام و پس از استخراج پروتئین تام سلولی و با تکنیکهای SDS-PAGE و لکه گذار ی وسترن باند بیانی مورد نظر تایید شد. بررسیها نشان داد پروتئین نوترکیب بیان شده عمدتاً به شکل نامحلول اینکلوژن باد ی در سلول انباشته میشود؛ لذا پس از محلول ساختن این تودهها با کمک مواد احیا کننده شرایط ایجاد ساختمان طبیعی تأمین شد. پروتئین بدست آمده با روش دیالیز از ترکیبات زاید عاری، توسط ستون نیکل تخلیص و غلظت آن با کمک روش برادفورد سنج یده شد. اثر اسمو تین نوترکیب بر قارچ ها ی Verticillium ،Fusarium oxysporum ،Sclerotinia sclerotiorum ،Botrytis cinerea ،Rhizoctonia solani Alternaria solani و dahlia توسط روشهایSpore Germination و Disk Diffusion ،Radial Diffusionبررسی و مشاهده شد که این پروتئین رشد قارچهای فوق را مهار میکند. از این رو میتوان نتیجه گرفت که پروتئین مزبور در سیستم پروکاریوتی به صورت فعال بی ان میشود و میتواند رشد قارچ را مهار کند

کلیدواژه ها:

اسموتین ، بیان پروکاریوتی ، پروتئین ضدقارچی ، PRپروتئینها ، اینکلوژن بادی