تولید و بیان پروتئین نوترکیب اسپرم Izumo

سال انتشار: 1391
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 932

فایل این مقاله در 5 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

این مقاله در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS12_0140

تاریخ نمایه سازی: 5 بهمن 1392

چکیده مقاله:

غشای پلاسمایی سراسپرم محل اصلی برهمکنش با اووسیت است و پروتئینهای عملکردی مهمی در این فرآیند نقش دارند. مطالعه بیولوژی مولکولی اسپرم تا حد زیادی به منظور پایه گذاری مدلهایی برای ناباروری جنس نر صورت می گیرد. آنتی بادیهای ضد اسپرمی (ASA) به عنوان عامل اصلی ناباروری ایمنولوژیکی شناخته می شوند و برای غیرفعالسازی اسپرمها می توان از آنها استفاده کرد، زیرا باعث نقص در برهمکنش اسپرم- اووسیت می شوند. از آنجا که آنتی بادیها در اسپرم زنده قادر به نفوذ در غشای سلولی خارجی نیستند، بنابراین آنالیز آنیژنی باید محدود به آنیژنهای غشای خارجی اسپرم باشد. از این رو در این پژوهش پروتئین غشایی اسپرم به نام Izumo انتخاب شد و قطعه ای هیدروفیل از آن برای همسانه سازی و بیان پروتئین مورد استفاده قرار گرفت. پس از استخراج RNA از بافت اپیدیدم، cDNA ساخته شد و قسمتی از تراتسکریپت ژن ایزومو با استفاده از آغازگرهای خارجی و داخلی به شیوه nested-PCR ترانسفورم شد. سپس از قطعه با آنزیمهای BamHI و NcoI برش یافت و در ناقل بیانی pQE60 کلون شدند. کلونیهای مثبت حاوی ژن مورد نظر با IPTG القا شدند و پروتئین تولیدی پس از جداسازی از غشاهای باکتریایی توسط ستون کروماتوگرافی نیکل- سفارز خالص سازی شد. چنین انتظار می رود این پروتئین خالص شده تولید آنتی بادی های ضد اسپرمی را در بدن خرگوش القا کند.

کلیدواژه ها:

آنتیبادیهای ضد اسپرمی- اسپرم- ناباروری ایمنولوژیکی- ایزومو

نویسندگان

زهرا وثاق همدانی

دانشجوی کارشناسی ارشد پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

ناصر فرخی

عضو هیئت علمی دانشگاه صنعتی شاهرود

فرید حیدری

عضو هیئت علمی پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

مهدی شمس آرا

عضو هیئت علمی پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری