ورود
مقالات فارسیISIکنفرانسهاژورنالها

بیان نوترکیب پپتید آمیلوئید بتای ۴۲-۱ (Aβ۱-۴۲) در سیستم باکتریایی Escherichia coli

محل انتشار: فصلنامه زیست فناوری، دوره: 15، شماره: 4
سال انتشار: 1403
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 274

فایل این مقاله در 12 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:
https://civilica.com/doc/2159862

شناسه ملی سند علمی:

JR_BIOT-15-4_002

تاریخ نمایه سازی: 4 بهمن 1403

چکیده مقاله:

مقدمه: پپتید آمیلوئید بتا (Aβ) علت اصلی تشکیل پلاگ های سمی در بیماران آلزایمری می باشد. به همین علت، مطالعه بر روی این پپتید و شناخت مکانیسم های مولکولی و سلولی مرتبط آن، در تشخیص و درمان بیماری ضروری است. پژوهش حاضر یک روش سریع، آسان و ارزان برای تولید و خالص سازی این پپتید ارائه داده که بر اساس بیان ژن Aβدر سیستم باکتریایی است. مواد و روش ها: ژن Aβسنتز و به وکتور بیانی pET۲۶b انتقال یافت. پس از القا با لاکتوز و انکوباسیون ۲۴ ساعته جهت بیان پپتید، رسوب سلولی حاصل به منظور بررسی و تایید وجود پپتید نوترکیب بوسیله SDS-PAGE و وسترن بلات بررسی گردید. سپس خالص سازی پپتید نوترکیب با روش کروماتوگرافی تمایلی ستون Ni-NTA صورت گرفت. تعیین ویژگی کشندگی سلولی Aβخالص، در غلظت های  µM ۲۵  و  µM ۵۰ با استفاده از آزمون MTT  بر روی لاین سلولی مدل آلزایمر(SH-SY۵Y) انجام شد. نتایج: نتایج PCR Colony و تعیین توالی تاییدکننده ورود صحیح قطعه بیان کننده Aβبه داخل وکتور بیانی می باشد. بررسی طول باندها در SDS PAGE و وسترن بلات، نمایانگر بیان موفقیت آمیز پپتید نوترکیب حاوی دنباله هیستیدینی می باشد. در نهایت نتیجه آزمون MTT نشان داد که پپتید خالص شده در غلظت های µM۲۵  و  µM۵۰ به ترتیب دارای کشندگی ۳۰ و ۵۰ درصدی است. بحث: تولید پپتید آمیلوئید بتا در میزبان های باکتریایی بسیار مطلوب به نظر می رسد. همچنین به دست آوردن پپتید Aβخالص به صورت محلول یک مزیت مهم این تحقیق می باشد. با توجه به عملکرد کشندگی پپتید خالص شده، میتوان از آن برای تیمار سلول های مدل و انجام مطالعات پیرامون آلزایمر استفاده نمود.

کلیدواژه ها:

نویسندگان

پوران بدیری

Department of Molecular Genetics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University

مجید صادقی زاده

Department of Molecular Genetics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University

بیژن بمبئ

Department of Systems Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology

سیده زهرا بطحائی

Department of Clinical Biochemistry, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University

مهرناز بحرینی

Department of Systems Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology

زرین مینوچهر

Department of Systems Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Hamley, I.W., The amyloid beta peptide: a chemist’s perspective. Role ...
  • Murphy, M.P. and H. LeVine III, Alzheimer's disease and the ...
  • Ballard, C., et al., Alzheimer's disease. the Lancet, ۲۰۱۱. ۳۷۷(۹۷۷۰): ...
  • Jia, L., et al., Highly efficient soluble expression, purification and ...
  • Prakash, P., et al., Rapid, refined, and robust method for ...
  • Tickler, A.K., A.B. Clippingdale, and J.D. Wade, Amyloid-β as a ...
  • Finder, V.H., et al., The recombinant amyloid-β peptide Aβ۱–۴۲ aggregates ...
  • Jia, L., et al., Expression and purification of amyloid β-protein, ...
  • Garai, K., et al., Expression and purification of amyloid-beta peptides ...
  • Dahlgren, K.N., et al., Oligomeric and fibrillar species of amyloid-β ...
  • Ying, Z., et al., Preparation and Characterization of a Monoclonal ...
  • Ryan, D.A., et al., An improved method for generating consistent ...
  • Chhetri, G., et al., An improved method for high-level soluble ...
  • Garai, K., et al., Expression and purification of amyloid-β peptides ...
  • Stephens, A.D., et al., Fast purification of recombinant monomeric amyloid-β ...
  • Walsh, D.M., et al., A facile method for expression and ...
  • Caine, J.M., et al., Oligomerization and toxicity of Aβ fusion ...
  • Jia, L., et al., Amyloidogenicity and Cytotoxicity of a Recombinant ...
  • Liao, Y.-H. and Y.-R. Chen, A novel method for expression ...
  • Long, F., W. Cho, and Y. Ishii, Expression and purification ...
  • Gopal, G.J. and A. Kumar, Strategies for the production of ...
  • Vosough, F. and A. Barth, Characterization of homogeneous and heterogeneous ...
  • Pujol-Pina, R., et al., SDS-PAGE analysis of Aβ oligomers is ...
  • Kim, E.-K., et al., Large-scale production of soluble recombinant amyloid-β ...
  • Hiroaki, H., Molecular mechanisms of amyloid-β peptide fibril and oligomer ...
  • Stine, W.B., et al., Preparing synthetic Aβ in different aggregation ...
  • Shobo, A., et al., Biophysical characterization as a tool to ...
  • Zhang, H., et al., Cellular response to β-amyloid neurotoxicity in ...
  • Leong, Y.Q., et al., Mechanisms of action of amyloid-beta and ...
  • Kronqvist, N., et al., Efficient protein production inspired by how ...
  • Satakarni, M. and R. Curtis, Production of recombinant peptides as ...
    • نمایش کامل مراجع