شناسایی مولکولی جدایههای Fusarium garminearum و Fusarium culmorum جدا شده از دانههای ذرت و جو مورد استفاده در گاوداریهای استان خراسان رضوی

با توجه به اینکه آلودگی غلات به انواع کپکهای مولد مایکوتوکسینها برای سلامتی انسان و دام خطرناک می باشد، این تحقیق با هدف بررسی میزان آلودگی نمونههای ذرت و جو مورد استفاده در خوراک دام در تعدادی از گاوداریهای صنعتی و غیر صنعتی استان خراسان رضوی به انواع قارچهای Fusarium graminearum و Fusarium culmorum انجام گرفت. به این منظور پس از کشت نمونهها به روش پورپلیت، جدایهها به روش کشت تک اسپور خالص شدند. جهت شناسایی جدایهها از دو محیط کشت PDA و CLA استفاده گردید. خصوصیات ماکروسکوپی و میکروسکوپی گونههای فوزاریوم جدا شده مورد بررسی قرار گرفت DNA قارچ از طریق واکنش PCR ابتدا با استفاده از پرایمر اختصاصی جنس فوزاریوم ابتدا با استفاده از پرایمر اختصاصی جنس فوزاریوم (ITS-F/R) و سپس دو جفت پرایمر اختصاصی فوزاریوم گرامیناروم Fg16-F/R و Fg16N-F/R و دو جفت پرایمر جهت شناسایی فوزاریوم کولموروم OPT18-F/R وFgc-F,Fcu-R مورد ارزیابی قرار گرفت. از بین 98 DNA ایزوله قارچی استخراج شده، در 78 نمونه یک قطعه 431 جفت بازی توسط پرایمر اختصاصی ITS-F/R تکثیر شد و از این تعداد 8 نمونه با تکثیر یک قطعه 280 جفت بازی طی واکنش با پرایمر اختصاصی Fg16N-F/R به عنوان فوزاریوم گرامیناروم شناسایی شدند. این نتیجه توسط پرایمر Fg16-F/R نیز با تکثیر یک باند 400 جفت بازی نیز مورد تائید قرار گرفت. نتایج حاصل از واکنش با هر دو جفت پرایمر اختصاصی فوزاریوم کولمورم هیچ گونه آلودگی به این نوع گونه قارچی را نشان نداد.

کلیدواژه ها:

ذرت ، جو ، Fusarium culmorum ، Fusarium graminearum ، PCR