کلونینگ وبیان ژن ‭HA03 ‬در سیستم بیانی پروکاریوتیک

کنه هیالوما آناتولیکم/آناتولیکم در بسیاری از نقاط کشور ایران پراکنده و از نظر بهداشتی و اقتصادی به عنوان یکی از مهمترین کنه های ایران مطرح می باشد. در حال حاضر واکسن تجارتی نو ترکیب ساخته شده از روده کنه تحت عنوان گاواک در دنیا وجود دارد که اطلاعات زیادی از مصرف یا اثر بخشی این واکسن در ایران وجود ندارد. در این تحقیق آنتی ژن نو ترکیب مشابه ‭Bm‬‮‭86‬ تحت عنوان ‭HA‬‮‭03‬ که در بانک ژنی به ثبت رسیده است و به عنوان اولین کاندیدای واکسن ازجدایه های ایرانی مورد ارزیابی قرار گرفته است. مطالعات نرم افزاری روی ‭HA‬‮‭03‬ در مقایسه با جدایه های دیگر شامل ‭BM‬‮‭86‬‭- BM‬‮‭95‬ و ‭HA‬‮‭98‬ نشان می دهد. این آنتی ژن حاوی هفت فاکتور رشد اپیدرمی غنی از سیستیین، یک ناحیه هیدروفوبیک بین غشایی، یک سکانس راهبرنده و چندین سایت گلیکوزیلاسیون می باشد. با این دستاوردها می توان گفت ‭HA‬‮‭03‬ یک گلیکو پروتیین غشایی بوده که معادل %‮‭89‬ ، %‮‭64‬ و %‮‭65‬ شباهت با ‭ HA‬‮‭98‬‭-BM‬‮‭86‬ و ‭BM‬‮‭95‬دارد، همچنین اطلاعات بدست آمده از مقایسه نرم افزاری چهار آنتی ژن فوق بیانگر این نکته مهم است که جدایه ایرانی می تواند به عنوان کاندیدای واکسن ضد کنه در ایران مورد ارزیابی قرار گیرد، در این پروژه سکانس نوکلیوتیدی حاوی ‮‭2190‬ جفت باز و ‮‭664‬ اسید آمینه را در سیستم پروکاریوت کلون وبیان شد در این راستا کلونینگ و بیان در ‭E.coli ‬انجام گردید. آنتی ژن تخلیص شده ‭HA‬‮‭03‬ با روش ایمونوبلاتینگ مورد ارزیابی و تایید قرار گرفت و ایمنی زایی آن روی خرگوش مورد آزمایش قرار گرفت. نتایج نشاندهنده ایمنی زا بودن آنتی ژن فوق در مقابل کنه.. هیالوما آناتولیکم آناتولیکم در خرگوش می باشد. واژه های کلیدی‭: HA‬‮‭03‬ بیان کنه آنتی ژن مخفی ‭ E. coli- ‬واکسن نو ترکیب