ردیابی پروتیین ‭Cry1Ab ‬و قطعات ‭DNA ‬نوترکیب در دستگاه گوارش و بافت های موش های صحرایی تغذیه شده با سیب زمینی تراریخته

پذیرش گیاهان تراریخته برای مصرف انسان و دام در سالهای اخیر رو به فزونی نهاده است. با وجودی که سازمانهای نظارتی استفاده از محصولات تراریخته را پذیرفته اند ولی مصرف کنندگان هنوز نگران انتقال قطعات ‭DNA ‬تراریخته از غذا به سلولهای سایر موجودات زنده موجود در بدن انسان و دام هستند. مطالعات در زمینه سرنوشت ‭DNA ‬موجود در غذا در دستگاه گوارش و جذب و انتقال احتمالی آنها به سایر بافتها برای رفع این نگرانی ها بسیار مهم است. بنابراین، برای بررسی ایمنی غذاهای تراریخته، پایداری و بقای تراژنها در دستگاه گوارش حیوانات باید مورد بررسی قرار گیرد. در این پژوهش برای بررسی میزان پایداری قطعات نوترکیب سیب زمینی تراریخته مقاوم به بید سیب زمینی (حاوی ژن ‭cry‬1‭Ab) ‬در دستگاه گوارش و احتمال جذب آنها، در مقایسه با ‭DNA ‬داخلی گیاه، از مدل حیوانی موش صحرایی استفاده شد. در طی دوره تغذیه میزان مصرف آب و غذا و همچنین وزن موشها مورد بررسی قرار گرفت. پس از اتمام یک دوره خوراک دهی‮‭90‬ روزه موش های صحرایی، نمونه هایی از محتویات دستگاه گوارش، بافتهای دستگاه گوارش، خون و سایر بافت ها برداشته شد. به کمک تکنیک های واکنش زنجیره ای پلیمراز و‭ELISA ‬بررسی نمونه ها جهت شناسایی قطعات دی.ان.ا ی و پروتیین نوترکیب صورت گرفت. پس از استخراج دی.ان.ا و بررسی کمیت وکیفیت آن، اقدام به شناسایی و ردیابی قطعات مختلف تراژن با روش واکنش زنجیرهای پلیمراز و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی قطعات داخل ژنی شد. براساس نتایج بدست آمده، قطعات ژن کلروپلاستی ‭(cp) ‬و قطعات ژن داخلی موش به عنوان کنترل داخلی ‭(my) ‬به عنوان ژن شاهد درهر دو گروه از موشهای تغذیه شده با سیب زمینی تراریخته وغیرتراریخته شناسایی شد. نتایج واکنش زنجیرهای پلیمراز برای پیشبر‭nos ‬و ژن ‭nptII‬و در تعدادی از نمونههای محتویات دستگاه گوارش گروه های تغذیه شده با سیب زمینی تراریخته مثبت بود و درنمونه مربوط به بافت ها وخون و گروه کنترل هیچ قطعه ای مشاهده نشد. نتایج واکنش زنجیرهای پلیمراز برای قطعات ژن ‭cry‬1‭Ab‬، هیچ قطعه ای درگروه های تراریخته و در بافت ها و خون و گروه کنترل مشاهده نشد. نتایج الایزا مربوط به حضور پروتیین ‭Cry‬1‭Ab ‬در بخش های مختلف دستگاه گوارش نشان داد که این پروتیین در برخی نمونه های محتویات دستگاه گوارش گروه های تغذیه شده با سیب زمینی تراریخته نوردیده قابل ردیابی می باشد. در بافت ها، خون، گروه های کنترل و سیب زمینی تراریخته تاریکی بیان پروتیین مشاهده نشد. همچنین ارزیابی حضور پروتیین ‭NptII ‬با استفاده از روش الایزا نشان داد که این پروتیین در محتویات دستگاه گوارش موشهای تغذیه شده با سیب زمینی تراریخت نوردیده و نورندیده قابل تشخیص است. دلیل این امر وجود پیشبر دایمی برای ژن ‭nptII ‬است که باعث بیان آن در هر شرایطی می گردد. نتایج این تحقیق نشان داد که سرنوشت دی.ان.ا طبیعی یک ماده غذایی و دی.ان.ا تراژن در دستگاه گوارش یکسان است. سرنوشت دی.ان.ا ی موجود در غذای تراریخته و غیرتراریخته در دستگاه گوارش موش یکسان است و حضور قطعاتی از این ژنها در بخشهای مختلف دستگاه گوارش موش طبیعی است. واژه های کلیدی: الایزا، ردیابی، پی سی آر، دستگاه گوارش، سیب زمینی تراریخت، موش