تهیه واکسن زنده گامبورو با سویه ‭Intermediate ‬به روش کشت سلولی

در این پروژه برای تهیه واکسن زنده گامبورو از سویه واکسینال ‭Intermediate ‬موجود در موسسه رازی به عنوان ‭Master seed ‬استفاده شد. ابتدا ‭Master seed ‬را در کشت سلول مونولایر فیبروبلاست جنین جوجه ‭(CEF) ‬تخم مرغ جنین دار ‭SPF ‬تکثیر گردید و بذر مادر ‭(working seed) ‬تهیه شد. پس از انجام آزمایش های ‭Sterility ‬و عیارسنجی، بذر مادر در حجم های یک میلی لیتری تقسیم شده و در ‮‭70‬ - درجه سانتیگراد قرارداده شد. در مرحله بعد برای تهیه واکسن، ویروس بذر مادر را در سلول ‭CEF‬تکثیرگردید و آزمایش های ‭Sterility ‬و عیارسنجی ویروس انجام شدکه برابر = ‮‭9.106‬ ‭TCID‬‮‭505‬ ‭/ ml Titer ‬بود. عیار واکسن برابر =‮‭2.106‬ ‭TCID‬‮‭1000/ 50‬ ‭doses Titer ‬پس از لیوفیلیزاسیون بدست آمد. در آزمایش بیضرری ‭(Safety ) ‬واکسن، ‭B:B Index ‬جوجه های مایه کوبی شده بین 1 تا 2 متغیر و با میانگین ‮‭1/5‬ثبت گردیدکه بیش از دوبرابر بهتر از حداقل مورد نیاز استاندارد (‮‭0/7‬) می باشد. در آزمایش ‭potency ‬که بااستفاده از الایزا انجام شد ، جوجه های مایه کوبی شده از عیار آنتی بادی مناسبی برخوردار بوده و میزان‭CV ‬آن ها نیز حاکی از یکنواختی تیتر در بین جوجه ها ی واکسینه بود. آزمایش ‭Efficacy ‬نیز که در طی آن جوجه های مایه کوبی شده و گروه کنترل با ویروس حاد گامبورو چالنج گردیدند حاکی از مقاومت صد درصدی جوجه های مایه کوبی شده در برابرچالنج با ویروس حاد بود .