مقایسه روش کشت و ‭PCR ‬در تشخیص آزمایشگاهی ‭Melissococcuss plutoius ‬عامل اولیه بیماری لوک اروپایی در کلنی های زنبورعسل.

بیماری لوک اروپایی، بیماری نوزادان زنبور عسل می باشد. این بیماری از جمله بیماریهای خطرناک برای کلنی های زنبور عسل محسوب می شود و در اثر باکتری گرم مثبت ملیسوکوکوس پلوتونیوس ایجاد می گردد. این بیماری به صورت گسترده ای در جهان پراکنده است و در برخی از نواحی مشکلات فزآینده ای را ایجاد می نماید. پیشرفت های اخیر در تکنولوژی مولکولار، تشخیص هویت باکتری را بسیار سهل و آسان نموده است و تکنولوژی تشخیص اسیدهای نوکلییک بسرعت جایگزین روش سنتی میکروبیولوژی شده است. بیماری لوک اروپایی در فهرست بیماریهای خطرناک برای بهداشت دامها قرار دارد و در بسیاری از مناطق بیماری آندمیک بوده و اپیدمی های فصلی ایجاد می کند. البته سناریوی این بیماری در کشورهای مختلف متفاوت است. تستهای حدت بیماری بر روی تک تک لاروها نشان می دهد که سویه های ملیسوکوکوس پلوتونیوس جمع آوری شده از مناطق مختلف جغرافیایی اروپا از نظر توانایی ایجاد مرگ و میر در لاروها، متفاوت هستند. روش کار: با استفاده از سویه باکتری استاندارد و با استفاده از پرایمر های اختصاصی، ‭PCR ‬راه اندازی گردید. از ‭DNA ‬باکتری رقت سازی شد و ‭PCR ‬به عمل آمد تا حساسیت روش تعیین گردد. سپس اختصاصی بودن پرایمر ها با باکتریهای گرم مثبت و منفی سنجیده شد. محصول ‭PCR ‬روی ژل آگارز 1 درصد الکتروفورز شد. همچنین با مراجعه به زنبورداریهای مشکوک به این بیماری از ‮‭12‬ زنبورستان نمونه برداری شد .(لارو) نمونه ها همزمان با روش کشت باکتریایی و روش ‭PCR ‬مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج: حساسیت آزمایش ‭PCR ‬‮‭2.0‬ ‭pg/ l ‬تعیین شد. از ‮‭12‬ نمونه اخذ شده از زنبورستان های مشکوک ، 8 نمونه در ‭PCR ‬مثبت و 2 نمونه در کشت مثبت شد.