بررسی پلی مورفیسم ژن ‭HA03 ‬در بین کنه های هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم

ژن ‭HA‬‮‭03‬ از روده میانی کنه غالب ایران، هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم، جدا شده و توالی آن در بانک ژن ثبت گردیده است. این ژن همولوگ ژن ‭BM‬‮‭86‬ جدا شده از کنه بوافیلوس میکروپولوس می باشد که پروتیین کد شونده توسط آن در ساخت واکسن های نوترکیب ضدکنه موجود مورد استفاده واقع شده است. با توجه به اینکه واکسن های موجود ضد کنه تاثیر کمی روی کنه های بومی ایران داشته و همچنین تحقیقات نشان می دهد که استفاده از آنتی ژن های اختصاصی هرگونه برای ساخت واکسن علیه همان گونه بسیار موثرتر می باشد، لذا ساخت واکسن بر پایه آنتی ژن ‭HA‬‮‭03‬ علیه ایزوله های ایرانی امری ضروری می باشد کنه ها فراوان ترین انگل دام در مناطق گرم و به طور کلی بیونیب های پست و ارتفاعات متوسط زندگی می کنند. خون خواری مستقیم کنه ممکن است موجب کم وزنی و وزن کم و انتقال بیماری های خطرناک شود. بدون کنترل کنه ها افزایش محصولات دامی در کشور های در حال توسعه امکان پذیر نیست. کنه هیالوما به طور گسترده ای در مناطق مختلف ایران پراکنده بوده که منجر به خسارات زیاد اقتصادی به صنعت دامپروری ونیز بهداشت انسان می شود. دفع آفات به داخل کشور شده است. با وجود استفاده گسترده از آفت کشها، میزان خسارات کنه ها قابل توجه است. مطالعات اخیر نشان داده اند استفاده از آنتی ژن های پنهان در تهیه واکسن علیه کنه یک راهبرد موثر و مناسب است. واکسن ‭Tick GARD ‬در کوبا و ‭GAVAC ‬در استرالیا بر پایه آنتی ژن نوترکیب ‭Bm‬‮‭86‬ کنه بوافیلوس میکروپولوس ساخته شده است. گزارشات علمی نشان داده است واکسن ‭Tick GARD ‬تا حدی نقش محافظتی علیه کنه هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم داشته است‭. HA‬‮‭03‬ ژن مشابه ژن ‭Bm‬‮‭86‬ که از کنه هیالوما است. این ژن در موسسه واکسن و سرم سازی رازی از کنه هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم جدا و در بانک ژن ثبت شده است. طول آن حدود ‭bp‬‮‭2200‬ می باشد. با توجه به اینکه ‭HA‬‮‭03‬ بعنوان کاندیدای مناسبی برای واکسن نوترکیب علیه کنه هیالوما مطرح است، مطالعه ساختار ژنتیکی آن بین ایزوله های جدا شده از مناطق جغرافیایی متفاوت برای شناخت میزان پلی مورفیسم و ثبات ساختار آنتی ژنیک و ایمونولوژیک آن مهم می باشد. در این مطالعه ژن ‭HA‬‮‭03‬ازکنه های شهرهای مختلف ایران شامل بوشهر، مسجد سلیمان، لرستان، بویین زهرا، قم، بوشهر و کردان جداسازی شد. تکثیر این ژن با واکنش ‭PCR ‬با پرایمرهای ‭HA‬‮‭03‬‭F/HA‬‮‭03‬‭R ‬بود و قطعه بدست آمده در وکتور‭pTZ‬‮‭57‬‭R/T ‬کلون شد. صحت کلونهای بدست آمده ابتدا با ‭PCR ‬و سپس با تعیین توالی تایید شد. توالی قطعات کلون شده در کمپانی ‭Macrogene ‬تعیین شد. بررسی توالی ‭DNA ‬و پروتیین موجود در آین قطعات که از مناطق دور و نزدیک ایران شامل: لرستان، قم، بویین زهرا، کردان، بوشهر و بودند نشان داد که در 5 منطقه، نوکلیوتید ها تغییر پیدا کرده اند. اگرچه این تنوع بر روی کدون های اسید آمینه ها هم تا حدودی مشاهده می شوند ولی میزان ثبات مشاهده شده در ساختار پروتیینی اول، آنتی ژنیسیته و ایمونوژنیسیته ژن ‭HA‬‮‭03‬ برای طرح بعنوان واکسن نوترکیب علیه کنه هیالوما قابل قبول می باشد.. کلید واژه: پلی مورفیسم- واکسن نوترکیب- کنه هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم ، ‭HA‬‮‭03‬ ، کلون کردن، توالی