بررسی حدت ویروسهای نیوکاسل جدا شده از شیوع اخیر بیماری در مرغداری های تخمگذار

نیوکاسل از مهمترین بیماری های طیور است که باعث خسارات شدیدی به صنعت مرغداری می شود. عامل این بیماری، پارامیگزو ویروس است. خطر انتقال ویروس توسط لاشه کشتاری وجود دارد، ترشحات و مخاط چشم طیور آلوده منشا ویروس می باشد. پرندگان وحشی منبع آلودگی و انتشار ویروس بوده و شاید ویروس قسمتی از سیر تکاملی خود را در بدن این نوع پرندگان وحشی بگذراند. در سال های اخیر به دلیل رشد روز افزون صنعت مرغداری تخمگذار، اهمیت این بیماری بیشتر مورد توجه قرار گرفته است و همواره به عنوان مهمترین عامل تهدید کننده طیور تخمگذار مطرح بوده است. گزارش های موجود از افت تولید به خصوص در بعضی استان ها، حاکی از آلودگی به ویروس بیماری نیوکاسل می باشد. جدا کردن افت تولید ناشی از این بیماری با وجود واکسیناسیون، نشان دهنده پاتوژنیسیته بالای این ویروس می باشد. با توجه به گستردگی زیاد واحدهای پرورش جوجه تخمگذار ، در شیوع اخیر افت تولید و گاهی تلفات در بعضی استانها گزارش شده است. این پروژه بر آن است که به صورت تجربی ویروس را در جوجه های تخمگذار مورد آزمایش قرار دهد. نمونه های مشکوک با علایم ظاهری نیوکاسل عصبی دریافت شد. مغز پرندگان در شرایط استریل برداشت شده در ‭PBS ‬هموژن شده و سوسپانسیون %‮‭10‬ حجمی از آنها تهیه شد. نمونه ها آماده سازی شدند. از هر نمونه آماده شده ‮‭0/1‬ میلی لیتر در حفره آلانتوییک تخم مرغ ‭SPF ‬جنین دار تلقیح شده و در انکوباتور C‮‭37‬ نگهداری شدند. مایع آلانتوییک تخم مرغ ها برداشت شد. روی نمونه تکثیر شده، آزمایش های تشخیصی سرولوژی، میکروسکوپ الکترونی و مولکولی ‭(RT-PCR) ‬انجام شد. از ویروس روی محیطهای استاندارد میکروبیولوژی کشت داده شد. با انجام آزمایش های مولکولی، خلوص نمونه از نظر وجود ویروس های بیماری زای طیور مورد بررسی قرار گرفت. عیار ویروس محاسبه شد. آزمایشهای اندیس بیماریزایی داخل مغزی ‭(Intracerebral pathogenicity index) ‬اندیس بیماریزایی داخل رگی ‭(Intravenous pathogenicity index) ‬و متوسط زمان مرگ ‭(Mean death time) ‬انجام شد. یک سالن پولت نژاد ‭BOVANS ‬با سن هجده هفته برای آزمایش در نظر گرفته شد. فارم مورد آزمایش طی پنج مرتبه تحت مایه کوبی نیوکاسل تولیدی موسسه رازی قرار گرفتند (روغنی ا بار، 1 B1 بار و لاسوتا 3 بار). جدایه ویروس ولوژن انتخاب و به پرندگان مورد آزمایش تزریق شد. در طول مطالعه هر روز علایم کلینیکی و کالبد گشایی در صورت وجود تلفات ثبت شد. تا دو هفته پس از چالش از پولت ها خونگیری بعمل آمده و آزمایش ‭HI ‬انجام شد. نمونه ویروس مورد نظر فاقد هرگونه آلودگی با باکتری، قارچ و مایکوپلاسما بود. در آزمایش مولکولی وجود ویروس نیوکاسل تایید شد. در آزمایش خلوص ، با انجام آزمایش های مولکولی، پاک بودن نمونه از نظر وجود سایر ویروس های بیماری زای طیور تایید شد. اندیس بیماریزایی داخل مغزی برابر ‮‭1/71‬ ، اندیس بیماری زایی داخل وریدی برابر ‮‭2/57‬ و متوسط زمان مرگ برابر ‮‭56‬ ساعت تعیین شد. نتیجه ارزیابی سرولوژی نشان داد که پس از چالش، در پولت های واکسینه شده یک افزایش عیار قابل ملاحظه ای ایجاد شد. گروه شاهد بعد از چالش تلف شدند. این تحقیق نشان داد که اگر واکسیناسیون به موقع و به طرز صحیح انجام شود تلفات و ضایعات ناشی از بیماری نیوکاسل به حد اقل خواهد رسید. واژه های کلیدی: ویروس، بیماری نیوکاسل، طیور تخمگذار، بیماری زایی