کلونینگ و بیان ژن کد کننده پروتیین نوکلیوکپسید ویروس سپتیسمی هموراژی ماهی قزل آلای رنگین کمان (Onchorhynchus mykiss) در باکتری اشرشیاکلی
سال انتشار: 1397
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 501
فایل این مقاله در 13 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_SKU-12-2_011
تاریخ نمایه سازی: 6 اسفند 1398
چکیده مقاله:
بیماری ویروسی سپتی سمی هموراژی (VHS) یکی از مهم ترین بیماری های ماهی قزل آلای رنگین کمان است که اخیرا در ایران شیوع گسترده ای یافته و خسارت های بسیار سنگینی را بر پرورش دهندگان تحمیل کرده است. به منظور شناسایی و اطمینان از وجود عامل بروز این تلفات، نمونه برداری از مزارع پرورشی استان چهارمحال و بختیاری- که کانون اصلی همه گیری و تلفات بالا بود- صورت گرفت. ماهیانی که علایم بالینی داشتند، انتخاب شدند و اندام های کلیه قدامی، طحال، قلب و مغز آنها جدا و در الکل 70 درصد ذخیره گردید. بر اساس آزمایش RT - PCR بیماری VHS تایید شد، سپس برای استفاده در بررسی سرولوژیک VHS، یک قطعه از ژن نوکلیوکپسید (N) ویروس VHS، با پرایمرهای پیشنهادی OIE و اندکی تغییر، تکثیر شد و قطعه موردنظر در وکتور PMAL- C2X کلون و سپس در باکتری اشیر شیاکلی Rosetta بیان گردید. پروتیین بیانی با کمک ستون کروماتوگرافی رزین آمیلوز خالص گردید. پروتیین هدف با وزن 61KDa از طریق SDS -PAGE و متعاقب آن ایمونوبلاتینگ ارزیابی شد. مشاهده بیان پروتیین با وزن ملکولی قابل انتظار در SDS - PAGE و واکنش مثبت این پروتیین با سرم موش ایمن شده با پروتیین MBP در ایمونوبلات نشان دهنده بیان موفق این قطعه از پروتیین در باکتری اشرشیاکلی بود
کلیدواژه ها:
نویسندگان
رویا رهنما
دانشجوی دکترای تخصصی بهداشت و بیماری های آبزیان، گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز،اهواز - ایران
رحیم پیغان
استاد، گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز - ایران
مسعود رضاصیفی آبادشاپوری
استاد، گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز - ایران.
آناهیتا رضایی
دانشیار، گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز - ایران
نسترن شهبازیان
استادیار، سازمان دامپزشکی کل کشور، تهران - ایران.