بررسی گلخانه ای بروز ژن Hsp70 در شته ی مومی کلم در شرایط کاربرد سالیسیلیک و سولفوریک اسید در گیاه کلزا

پژوهش حاضر برای بررسی مولکولی تاثیر مقاومت اکتسابی گیاه کلزا در شته مومی کلم اجرا شد. پروتیین های شوک دمایی از موجودات زنده، در برابر استرس های محیطی محافظت می کنند. در این پژوهش، از میزان بیان ژن پروتیین Hsp70 در این شته، یکی از پروتیین های شوک دمایی، به عنوان معیاری از تاثیر گیاه تیمار شده با سالیسیلیک اسید بر روی شته استفاده شد. شته در اتاقک رشد روی گیاه کلم زینتی در شرایط 8 ساعت تاریکی و 16 ساعت روشنایی در دمای 18-28 درجه ی سانتی گراد و با رطوبت نسبی 70-40 درصد پرورش یافت و سپس، پوره های سن یک شته ی مومی کلم با استفاده از قلم مو به برگ های کلزا رقم اکاپی در مرحله 5-6 برگی منتقل شدند. این بوته ها تحت تیمار پرایمینگ بذر با سالیسیلیک اسید 0 و 75 میکرو مولار قرار گرفته و در گلدان های حاوی حدود 5 کیلوگرم خاک گلخانه کشت شدند. و همچنین در مرحله 4-5 برگی، با سولفوریک اسید 0 و 5./. درصد به همراه آب آبیاری تیمار شده بودند. پس از 30 روز، از هر تیمار، 30 عدد شته برای بررسی بیان ژن نمونه برداری شد. استخراج آر.ان.ای کل از نمونه های شته ی مومی کلم مطابق با دستورالعمل شرکت سازنده انجام شد و در ادامه cDNA سنتز شد. در نهایت تکثیر کمی ژن پروتیین Hsp70 به همراه ژن استاندارد 16S rRNA انجام شد. نتایج واکنش زنجیره ای پلی مراز کمی، نشان دهنده ی افزایش بیان ژن Hsp70 در شته های تغذیه کرده از گیاهان تیمار شده در مقایسه با شته های گیاهان شاهد بود.