شناسایی و توالی یابی ژن کد کننده پروتیین شوک حرارتی 90 در Rutilus frisii kutum

جمله امور مهم برای بقای حیات سلول، تا خوردگی صحیح پروتیین ها می باشد. چاپرن های مولکولی، پروتیین هایی هستند که به وفور و با تنوع بالا در سلول یافت می شوند و اصلی ترین مسیولیت آنها تنظیم تا خوردگی پروتیین ها است. پروتیین های شوک حرارتی همان HSP ها از جمله این چاپرن ها هستند و یکی از مهمترین اعضای این خانواده، پروتیین HSP90 می باشد. این پروتیین که فراوانترین پروتیین سلول نیز می باشد (حدود 1,2 % کل پروتیین های سلول در حالت عادی)، علاوه بر نقشی که ذکر شد در امور دیگر مانند تجمع پروتیین های مسیر های سیگنالینگ سلولی، حایز اهمیت می باشد. در این تحقیق ما پروتیین HSP90 گونه Rutilus frisii kutum ماهی سفید دریای خزر که گونه بومی ایرانی می باشد را مورد بررسی قرار می دهیم. از آنجا که تا کنون تحقیقی بر روی این پروتیین در این گونه انجام نپذیرفته است، ابتدا با استفاده از تکنیک PCR دو مرحله ای که با استفاده از cDNA سنتز شده از روی RNA استخراج شده از بافت کبد ماهی ذکر شده توالی نوکلیوتیدی این پروتیین تعیین شد و دیده شد که این توالی همولوژی بالایی با پروتیین HSP90 گونه هایی مانند Cyprinus carpio و Gobiocypris rarus دارد. همچنین برای بیان پروتیین مورد نظر، ژن آن توسط pEt-28 وارد سلول BL21 گردید. مطالعات ساختاری این پروتیین در این آزمایشگاه در حال انجام است

کلیدواژه ها:

چاپرن ، پروتیین شوک حرارتی ، Rutilus frisii kutum ، HSP90