طراحی و به کار گیری روش LAMP در جهت تشخیص مولکولی استرپتوکوک پیوژنز

استرپتوکوکوس پیوژنز کلونیزه کننده پوست و گلو در بسیاری از انسان هاست این باکتری علاوه بر عفونت های چرکی حاد مسیول عوارض و بیماری های خود ایمن بعد از عفونت شامل آرتریت واکنشی گلومرولونفریت و تب روماتیسمی می باشد روش استاندارد طلایی برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز کشت است اما به دلیل زمان بر بودن روش مذکور و اهمیت تشخیص سریع آن استفاده از روش های مولکولی مفید است تکنیک LAMP روش نسبتا جدیدی است که حساسیت و اختصاصیت بالایی در تشخیص عفونت های باکتریایی دارد هدف از این مطالعه استفاده از تکنیک LAMP بر اساس ژن ستوکرم اکسیداز oxaA برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز است مواد و روش ها:روش LAMP با 6 پرایمر برای توالی خاص oxaA در استرپتوکوکوس پیوژنز طراحی شد غلظت های مختلفی از سولفات منیزیم دزوکسی نوکلیوتید تری فسفات و پرایمرها برای بهینه سازی روش استفاده گردید نتایج واکنش LAMP با غلظت های 10 uM از هر کدام از پرایمرهای F3، LF ، LBو B3 40 uM از هرکدام از پرایمرهای FIPوBIPو0.4mM dNTPs و mM MgSo48 طی 1 ساعت و در دمای 63 درجه سانتی گراد راه اندازی گردید نتیجه گیری:روش LAMP در مقایسه با PCR روشی سریع برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز می باشد

کلیدواژه ها:

استرپتوکوکوس پیوژنز ، Loop mediated isothermal amplification assay ، تشخیص اختصاصی