خالص سازی نسبی آنزیم لیپاز حاصل از سویه Ochrobactrum intermedium 101MZV جداسازی شده از چشمه قینرجه نیر به هدف بکارگیری در صنایع شوینده

لیپازها گروهی از آنزیم ها هیدرولازی می باشند که با هیدرولیزباندهای استری تری گلیسریدهای زنجیره بلند باعث تجزیه آن ها به گلیسرول چرب می گردند. در سال های اخیر استفاده از آنزیم های میکروبی مانند لیپاز در صنایع شوینده بسیار مورد توجه قرار گرفته است. آنزیم لیپاز علاوه بر افزایش قدرت پاک کنندگی، دارای فواید زیست محیطی با کاهش مصرف انرژی شستشوی کوتاهتر، کاهش دمای شستشو و کاهش میزان مصرف آب می باشند و همچنین منجر به کاهش pH آب شستشو و مراقبت های ویژه از پارچه می شود. بکارگیری آنزیم در فرمول شوینده ملزم به داشتن فاکتورهایی شامل داشتن پایداری و فعالیت در دماهای 30-60 درجه سانتیگراد، در pH قلیایی 12-9 در حضور بازدارنده ها یا غیرفعال کننده ها می باشند. هدف از این پژوهش حالص سازی نسبی آنزیم لیپاز حاصل از سویه Ochrobactrum intermedium 101MZV جهت بکارگیری در صنایع شوینده می باشد. اپتیمم آنزیم لیپاز سویه Ochrobactrum intermedium 101MZV می باشد. استفاده از آنزیم لیپاز در صنایع شوینده نیاز به کسب میزان خلوص بالا آنزیم نیست. برای رسوب دهی آنزیم لیپاز از روش رسوب دهی با استفاده از آمونیوم سولفات و درادامه دیالیز جهت نمک زدایی و روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون برای جداسازی نسبی آنزیم مورد نظر استفاده شد. میزان فعالیت آنزیم لیپاز تخلیص شده با استفاده از پارانیتروفنیل پالمیتات به عنوان سوبسترا و میزان پروتئین این آنزیم با استفاده از روش لوری، در مراحل مختلف تخلیص اندازه گیری شد. نتایج حاصل از خالص سازی، میزان از ، فعالیت ویژه آنزیمی (U/mg) 3.261 به فعالیت ویژه آنزیمی 62.270(U/mg)، درصد بازده 48.452 و تخلیص 19.095 بود. وزن مولکولی آنزیم لیپاز حاصل از سویه 101MZV با استفاده از روش الکتروفورز بر ژل SDS-PAGE (~99.42kDa) تخمین زده شد.

کلیدواژه ها:

، Ochrobactrum intermedium ، لیپاز ، صنایع شوینده ، خالص سازی