تهیه آنتی بادی پلی کلونال جهت تشخیص سرولوژیکی بیماری جاروی جادوگر لیموترش در استان کرمان

برای تهیه آنتی بادی جاروک لیموترش 20 گرم رگبرگ لیموترش آلوده از منطقه جهاد آباد جیرفت با 5 حجم 0/3 مولار گلایسین 8، PH حاوی 0/02 کولار کلرید منیزیم و 0/02 مولار سولفیت سدیم (بافر GMX) هموژنیزه و عصاره به مدت 15 دقیقه در 2000g و یک ساعت در 39000g سانتریفوژ گردید. رسوب حاصل از این مرحله پس از تیمار با آنتی بادی تولید شده بر علیه پروتئین های گیاه سالم در دور پائین و و بالا به روش فوق سانتریفوژ شد و رسوب نهایی در یک میلی لیتر بافر pH, 7/4 phosphate buffered saline) PBS) حل و پس از مخلوط کردن بافررسوب حل شده با هم حجم خود روغن اجوانت ناقص چهار بار به فاصله یک هفته به ماهیچه پای خرگوش و زیر پوست پشت گردن خرگوش یک در میان تزریق شد. دو هفته بعد از آخرین تزریق آنتی سرم جدا و سیستم الیزا راه اندازی شد. آنتی سرم تهیه شده در این آزمایش در رقت های 1:20 و 1:100 واکنش خوبی با نمونه های آلوده داد و با گیاه سالم و یک فیتوپلاسمای دیگر واکنشی نداد.

کلیدواژه ها:

جاروی جادوگر لیموترش ، آنتی بادی پلیکلونال ، فیتوپلاسما