جداسازی، کلونینگ، تعیین توالی و مطالعه ژن Polygalacturonase inhibiting protein (pgip2)

سال انتشار: 1384
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 1,818

فایل این مقاله در 7 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

NBCI04_180

تاریخ نمایه سازی: 30 دی 1386

چکیده مقاله:

آنزیمهای پلی گالاکتورونازی قارچی با تخریب دیواره سلولی علاوه بر تأمین منابع غذایی برای رشد قارچ، نفوذ و کلونیزاسیون قارچی را نیز تسهیل می کنند. در دیواره سلولی لوبیای معمولی گالیکو پروتئینهای کهاری آنزیم پلی گالاکتوروناز PGIP=Polygalacturonase- inhibiting proteins .وجود دارد که قادرند طیف وسیعی از آنزیم پلی گالاکتورونازی های قارچی مختلف را تشخیص و مهار کنند. جهت مطالعه تنوع ژنی pgip ابتدا استخراج DNA ژنومی از برگ دو واریته لوبیا به روش CTAB انجام شد. سپس تکثیر ژن pgip2 به طول 1002 جفت باز ، با ایتفاده از پرایمرهای 2RB2/2RB1 شورت گرفت. از Mismatch پرایمرهای M2f, M2R1, M2R2, M1f, M1R داخلی ژنی برای شناسایی ژن pgip2 استفاده گردید. محصول pfu تکثیر شده پس از عضم آنزیمی، در سایت SacI/XbaI وکتور pUC18 کلون شد. پلاسمیدهای نوترکیب از باکتریهای E.coli DH5α ترانسفورم شده استخراج شده و در دو جهت تعیین توالی گردیدند. نتایج نشان داد که ژنهای Pvpgip2 واریته ناز و درخشان علیرغم داشتن اختلاف در 4 موقعیت نوکلئوتیدی 162 ،312، 588، 712، در سطح توالی اسید آمینه ای هیچگونه اختلافی را نشان نمی دادند.

نویسندگان

اباصلت حسین زاده کلاگر

گروه بیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه رازی

مصطفی مطلبی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

محمد رضا زمانی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری