کلونینگ و بیان ژن مصنوعی MaSp1 در وکتور باینری pCAMBIA1304 جهت بیان ویژگی یافته در الیاف پنبه

پنبه از محصولات زراعی مهم دنیاست افزایش کیفیت الیاف آن از اهمیت فراوانی در صنایع نساجی برخوردار است. رشته های تار عنکبوتمحکمترین و کشسانترین الیاف شناخته شده در طبیعت است. بدین جهت سازه ای مصنوعی طراحی گردید تا با بیان ویژه پروتئین تار عنکبوتدر الیاف پنبه منجر به افزایش کیفیت آن جهت ریسندگی شود.پس از سنتز سازه مورد نظر که ترکیبی از پروموتر ویژه بیان در فیبر پنبه،توالیکوزاک مانند در گیاهان و توالی مصنوعی بر اساس ژن MaSp1 است. ابتدا در جایگاه EcoRV پلاسمید pUC57 وارد شد و پس از تراریختیباکتری E.coli DH5 α پلاسمید مورد نظر توسط دو آنزیم EcoRI و NheI برش دوگانه داده شد و پس از استخراج قطعه مورد نظر بینجایگاه های برش EcoRI و NheI دروکتور باینری pCAMBIA1304 ساب کلون شد. پس از تراریختی E.coli DH5 α و استخراجپلاسمید جدید pCSP نامگذاری شد و Agrobacterium tumefaciensLBA4404 توسط آن تراریخته شد. درستی نتایج به وسیلهواکنش زنجیره ای پلیمراز توسط پرایمرهای ویژه ژن Sp1 مصنوعی و ژن مقاومت به هیگرومایسین مورد تایید قرار گرفت.هم اکنون تراریختیوبیان این سازه در الیاف پنبه به روش های گوناگون سونیکاسیون،اینفیلتراسیون و هم کشت با آگروباکتریوم در دست انجام می باشد.

کلیدواژه ها:

رشته تار عنکبوت ، فیبر پنبه ، تراریختی ، برش دوگانه